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논문 기본 정보

자료유형
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저자정보
저널정보
한국미생물생명공학회 Journal of Microbiology and Biotechnology Journal of Microbiology and Biotechnology 제14권 제3호
발행연도
2004.1
수록면
474 - 482 (9page)

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The a-L-arabinofuranosidase (Arfase) gene ofBacillus stearothermophilus No. 236 was cloned and sequenced.The ORF of the gene, designated arfA, encoded a 507-residuepolypeptide with calculated molecular mass of 57 kDa. TheArfase produced by a recombinant Escherichia coli straincontaining the arfA gene was purified to apparent homogeneityand characterized. The molecular mass of the Arfase determinedby SDS-PAGE was 60 kDa. However, according to gelfiltration, it was estimated to be approximately 190 kDa.These results indicated that the functional form of the Arfaseis trimeric. The optimal pH and temperature for the enzymeactivity were pH 6.5 and 55oC, respectively. The half-life ofthe enzyme at 60oC was about 6 h. Kinetic experiments at45oC with pNPAf (p-nitrophenyl a-L-arabinofuranoside) as asubstrate gave the Km and Vmax values of 1.19 mM and 26.1 U/mg, respectively. When the enzyme was combined withBacillus stearothermophilus No. 236 endoxylanase and b-xylosidase, it hydrolyzed arabinoxylan into L-arabinose andxylose more efficiently than Arfase alone. This synergisticeffect suggested that the complete hydrolysis of xylan withlarge amounts of arabinose side chains required Arfase aswell as endoxylanase and b-xylosidase.
#a-L-arabinofuranosidase #arfA #Bacillusstearothermophilus No. 236 #synergistic effect #xylanhydrolysisXylans #next to cellulose #are the most abundant polysaccharideson earth #and they are included within plant cell wallheteropolysaccharides referre

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