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Bacillus sp. HY-20균주 유래 endoxylanase를 코드하는 XylP 유전자를 효모에서 발현시키기 위해 두 개의 발현 플라스미드 pG-xylP와 pGMF-xylP를 구축하였다. 이들 플라스미드는 endoxylanase의 분비발현을 위해 각각 다른 분비서열인 XylP 유전자의 자체 분비서열(XylP s.s)과 최적화된 MFα 분비서열(MFα<sub>opt</sub> s.s)을 가지고 있으며, S. cerevisiae SEY2102와 FY833균주에 형질전환되어 그 분비활성이 비교 조사되었다. 재조합 endoxylanase는 분비발현시스템과 숙주세포에 따라 23.7~70.1 unit/ml의 활성으로 효모 세포에서 성공적으로 발현되었고, 그 중 SEY2102/pGMF-xylP 형질전환주를 이용해 baffled-flask 배양을 실시한 결과 최대 88.1 unit/ml의 endoxylanase 활성을 보임을 확인하였다. 대부분의 재조합 endoxylanase는 세포 외 분획에 효율적으로 분비 생산되었으며, MFα<sub>opt</sub> 분비서열이 XylP 유전자의 자체 분비서열보다 endoxylanase를 더 효율적으로 분비시킴을 확인할 수 있었다. 그러므로 본 연구에서 개발된 발현시스템은 효모를 숙주세포로 하여 많은 양의 세포 외 endoxylanase의 생산을 가능하게 하고, 바이오에탄올 생산 및 산업적 응용에도 유용하게 사용 될 수 있으리라 기대된다.
목차
Introduction
Materials and Methods
Results and Discussion
References
초록
참고문헌 (29)
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1. [학술지(정기간행물)] - Beg, Q. K. / 2001 / Microbial xylanases and their industrial applications : a review / Appl Microbiol Biotechnol 56 : 326 ~ 338
2. [학술지(정기간행물)] - HONG-GE CHEN / 2006 / Purification and Characterization of Novel Bifunctional Xylanase, XynIII, Isolated from Aspergillus niger A-25 / Journal of Microbiology and Biotechnology 16 (7) : 1132 ~ 1138
3. [학술지(정기간행물)] - Chomczynski, P. / 1987 / Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction / Anal Biochem 162 : 156 ~ 159
4. [학술지(정기간행물)] - Emr, S. D. / 1983 / An MF alpha, 1-SUC2(alpha-factor-invertase)gene fusion for study of protein localization and gene expression in yeast / Proc Natl Acad Sci USA 80 : 7080 ~ 7084
5. [학술지(정기간행물)] - Gietz, R. D. / 1995 / Studies on the transformation of intact yeast cells by the LiAc/SS-DNA/PEG procedure / Yeast 11 : 355 ~ 360
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5. [학술지(정기간행물)] - Gietz, R. D. / 1995 / Studies on the transformation of intact yeast cells by the LiAc/SS-DNA/PEG procedure / Yeast 11 : 355 ~ 360
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