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세균인 Paenibacillus sp. DG-22의 유전체 DNA library가 제조되었으며, β-xylosidase-양성 클론이 형광기질인 4-methylumbelliferyl-β-D-xylopyranoside (βMUX)를 사용하여 확인되었다. 이 클론으로부터 재조합 플라스미드가 분리되었고 삽입된 4.3-kb 크기 DNA의 염기서열이 결정되었다. β-xylosidase 유전자는 분자량이 78,710 dalton이고 pI가 5.0인 701개의 아미노산을 암호화하는 2,106 염기쌍의 열린해독틀(ORF)로 구성되어있었다. xylA 유전자산물의 추론된 아미노산 서열은 과(family) 52에 속하는 글리코실 가수분해효소로 분류된 β-xylosidase들과 상당한 유사성을 가지고 있었다. 이 xylA 유전자에 6개의 히스티딘-꼬리표를 붙이기 위해 pQE60 발현벡터에 다시 클로닝하였다. 재조합 β-xylosidase (XylA-H?)가 열처리와 고정화금속친화성 크로마토그래피(IMAC)에 의해 순수하게 정제되었다. XylA-H? 효소의 최적 pH와 온도는 각각 pH 5.5-6.0과 60℃이었다.
목차
Introduction
Materials and Methods
Results and Discussion
Acknowledgement
References
초록
참고문헌 (22)
참고문헌 신청
1. [학술지(정기간행물)] - Altschul, S. F. / 1997 / Gapped BLAST and PSI-BLAST: A new generation of protein database search programs / Nucleic Acids Res 25 : 3389 ~ 3402
2. [학술지(정기간행물)] - Baba, T. / 1994 / Identification and characterization of clustered genes for thermostable xylan-degrading enzymes, β-xylosidase and xylanase, of Bacillus stearothermophilus 21 / Appl. Environ. Microbiol 60 : 2252 ~ 2258
3. [학술지(정기간행물)] - Biely, P. / 1985 / Microbial xylanolytic systems / Trends Biotechnol 3 : 286 ~ 290
4. [학술지(정기간행물)] - Bradford, M. M. / 1976 / A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding / Anal. Biochem 72 : 248 ~ 254
5. [학술지(정기간행물)] - Bravman, T. / 2001 / Stereochemistry of family 52 glycosyl hydrolases: a β-xylosidase from Bacillus stearothermophilus T-6 is a retaining enzyme / FEBS Lett 495 : 39 ~ 43
2. [학술지(정기간행물)] - Baba, T. / 1994 / Identification and characterization of clustered genes for thermostable xylan-degrading enzymes, β-xylosidase and xylanase, of Bacillus stearothermophilus 21 / Appl. Environ. Microbiol 60 : 2252 ~ 2258
3. [학술지(정기간행물)] - Biely, P. / 1985 / Microbial xylanolytic systems / Trends Biotechnol 3 : 286 ~ 290
4. [학술지(정기간행물)] - Bradford, M. M. / 1976 / A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding / Anal. Biochem 72 : 248 ~ 254
5. [학술지(정기간행물)] - Bravman, T. / 2001 / Stereochemistry of family 52 glycosyl hydrolases: a β-xylosidase from Bacillus stearothermophilus T-6 is a retaining enzyme / FEBS Lett 495 : 39 ~ 43
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