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논문 기본 정보

자료유형
학술저널
저자정보
저널정보
대한생화학·분자생물학회 Experimental and Molecular Medicine Experimental and Molecular Medicine 제38권 제2호
발행연도
2006.1
수록면
134 - 143 (10page)

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Lysophosphatidic acid (LPA) is a phospholipid growth factor that acts through G-protein-coupled receptors. Previously, we demonstrated an altered profile of LPA-dependent cAMP content during the aging process of human diploid fibroblasts (HDFs). In attempts to define the molecular events asso-ciated with the age-dependent changes in cAMP profiles, we determined the protein kinase A (PKA) activity, phosphorylation of cAMP-response ele-ment binding protein (CREB), and the protein expression of CRE-regulatory genes, c-fos and COX-2 in young and senescent HDFs. We observed in senescent cells, an increase in mRNA levels of the catalytic subunit α of PKA and of the major regulatory subunit I α . Senescence-associated increase of cAMP after LPA treatment correlated well with increased CREB phosphorylation accompanying activation of PKA in senescent cells. In senescent cells, after LPA treatment, the expression of c-fos and COX-2 decreased initially, followed by an increase. In young HDFs, CREB phosphorylation decreased following LPA treatment, and both c-fos and COX-2 protein levels increased rapidly. CRE-luciferase assay revealed higher basal CRE-dependent gene expression in young HDFs compared to senescent HDFs. However, LPA-dependent slope of luciferase increased more rapidly in senescent cells than in young cells, presumably due to an increase of LPA-induced CREB phosphorylation. CRE-depen -dent luciferase activation was abrogated in the presence of inhibitors of PKC, MEK1, p38MAPK, and PKA, in both young and senescent HDFs. We conclude that these kinase are coactivators of the expression of CRE-responsive genes in LPA-indu -ced HDFs and that their changed activities during the aging process contribute to the final expression level of CRE-responsive genes.
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/ / Altered profile of transcription factor-binding activities in senescent human fibroblasts : 132 ~ 40 google schola / / Cyclic AMP stimulates somatosta-tin gene transcription by phosphorylation of CREB at serine 133 : 675 ~ 80 google schola / / Serine/threo-nine protein kinases and calcium-dependent protease in sen-escent IMR-90 fibroblasts : 13 ~ 24 google schola / / Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction : 156 ~ 9 google schola / / Transient induction of c-fos and c-myc in an immediate consequence of growth factor stimulation : 655 ~ 81 google schola

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