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High-temperature requirement protein A2 (HtrA2)는 대장균에서 42도 노출 시 세포 보호 기능을 하는 단백질인 HtrA의 human homologue로 동정되었다. 현재까지 human HtrA2는 미토콘드리아에 존재하는 serine protaese로 세포사멸 기능에 관여하는 것으로 알려져 있으나, 그 생리적 기능 및 mammalian 세포 내에서 heat shock에 대한 보호기능에 대해서 명확히 알려진 바가 없다. 최근 HtrA2 유전자가 결실된 mouse embryonic fibroblast (MEF)가 보고되어 세포 내 HtrA2의 기능 연구가 가능해 졌으나, 이 세포에 대한 정보가 많은 부분 밝혀져 있지 않다. 생리기능연구를 위해서는 자체의 특성들에 대한 조사가 선행되어야 차후 기능연구가 가능할 것이다. 본 연구는 HtrA2<SUP>+/+</SUP>, HtrA2<SUP>-/-</SUP> MEF 세포주를 확보하고, 두 세포주의 성장속도, 세포 형태 및, heat shock에 의한 세포사멸 정도를 측정하였다. 우선 HtrA2<SUP>+/+</SUP>, HtrA2<SUP>-/-</SUP> MEF 세포주에서 HtrA2의 발현 유무를 PCR과 IB로 확인하였고, fractionation을 통해 HtrA2<SUP>+/+</SUP> 세포주에서만 HtrA2가 미토콘드리아에 위치함을 확인하였다. 두 세포에서 형태학적인 차이가 있음을 Coomassie staining으로 확인하였고, 성장속도 또한 HtrA2<SUP>-/-</SUP> 세포주가 1.4배 빠름을 확인하였다. 현재까지 보고되지 않은 HtrA2의 고온에 대한 반응연구를 위해 본 연구에서는 heat shock 자극에서 세포사멸을 측정하여, 기존에 알려진 세포사멸자극에서와 동일하게 heat shock에 의해서도 세포사멸이 야기됨을 확인하였다. HtrA2<SUP>+/+</SUP>와 HtrA2<SUP>-/-</SUP> MEF 세포주를 이용한 연구에 있어, HtrA2 유무에 따른 세포의 생리학적 특징을 제공하였고, 향후 heat shock에 의한 세포사멸에서의 HtrA2 기능연구를 위한 중요한 기본 정보를 제공함으로써 HtrA2의 기능을 심도있게 연구하는데 사용할 수 있는 좋은 자료가 될 것이다.
목차
서론
재료 및 방법
결과 및 고찰
요약
감사의 글
References
참고문헌 (40)
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1. [학술지(정기간행물)] - Alam, M / 2002 / Rotenone destroys dopaminergic neurons and induces parkinsonian symptoms in rats / Behav. Brain. Res 136 : 317 ~ 324
2. [학술지(정기간행물)] - Althaus, J. / 2007 / The serine protease Omi/ HtrA2 is involved in XIAP cleavage and in neuronal cell death following focal cerebral ischemia/reperfusion / Neurochem. Int 50 : 172 ~ 180
3. [학술지(정기간행물)] - Baba, M. / 1998 / Aggregation of alpha-synuclein in Lewy bodies of sporadic Parkinson's disease and dementia with Lewy bodies / Am. J. Pathol 152 : 879 ~ 884
4. [학술지(정기간행물)] - Bonifati, V. / 2003 / Mutations in the DJ-1 gene associated with autosomal recessive early-onset parkinsonism / Science 299 : 256 ~ 259
5. [학술지(정기간행물)] - 임향숙 / 2006 / Zebrafish 동물모델에서 human HtrA2의 expression system 정립에 관한 연구 / 생명과학회지 16 (4) : 571 ~ 578
2. [학술지(정기간행물)] - Althaus, J. / 2007 / The serine protease Omi/ HtrA2 is involved in XIAP cleavage and in neuronal cell death following focal cerebral ischemia/reperfusion / Neurochem. Int 50 : 172 ~ 180
3. [학술지(정기간행물)] - Baba, M. / 1998 / Aggregation of alpha-synuclein in Lewy bodies of sporadic Parkinson's disease and dementia with Lewy bodies / Am. J. Pathol 152 : 879 ~ 884
4. [학술지(정기간행물)] - Bonifati, V. / 2003 / Mutations in the DJ-1 gene associated with autosomal recessive early-onset parkinsonism / Science 299 : 256 ~ 259
5. [학술지(정기간행물)] - 임향숙 / 2006 / Zebrafish 동물모델에서 human HtrA2의 expression system 정립에 관한 연구 / 생명과학회지 16 (4) : 571 ~ 578
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