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저자정보
정영신 (호서대학교 생명공학과) 박범수 (호서대학교 생명공학과) 한세희 (호서대학교 생명공학과) 이지연 (호서대학교 생명공학과) 김지영 (안전성평가연구소) 백승민 (안전성평가연구소) 박초롱 ((주)바이오톡스텍) 김수환 ((주)바이오톡스텍) 이종권 (식품의약품안전평가원 특수독성과)
저널정보
한국동물실험대체법학회 한국동물실험대체법학회 한국동물실험대체법학회 제11권 제1호
발행연도
2017.1
수록면
1 - 8 (8page)

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In order to establish a pig-a gene mutation assay as a regulatory test for evaluating in vivo genotoxicity in Korea, the transferability study as a stage II validation was performed using the test substance, N-ethyl-N-nitrosourea (ENU) across three laboratories. The lead laboratory (KIT) standardized the protocol using Rat MutaFlow® Kit and transferred the methodology to two participating laboratories (Hoseo University and Biotoxtech Co. Ltd.). Sprague Dawley rats were treated with vehicle or three dose levels of ENU (10, 20, 40mg/kg) by oral gavages on the 3 consecutive days. On the day 15 after the first treatment, bloods were collected and analyzed to estimate the percentage of reticulocytes (%RETs), mutant type of RETs and erythrocytes (RBC) using flowcytometer. In results, the exposure of ENU induced the dose-dependent increases in the mutant frequencies of RBC CD59- and RET CD59- , while %RETs were not affected. Data comparisons among three participating laboratories indicated the good transferability with the high correlation coefficients (0.97-0.99) between the lead and participating laboratories. In conclusion, the pig-a gene mutation assay may be the effective test for the estimation of in vivo gene mutation and the validation studies may be needed using more test substances in Korea.

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Aidoo A / 1997 / Development and utilization of the rat lymphocyte hprt assay / Mutat. Res 387:69~88 google schola Bhalli JA / 2011 / Report on stage III Pig-a mutation assays using Benzo[a]pyrene / Environ. Mol. Mutagen. 52:731~737 google schola Bhalli JA / 2013 / Sensitivity of the Pig-a assay for detecting gene mutation in rats exposed acutely to strong clastogens / Mutagenesis 28(4):447~455 google schola Bryce SM / 2008 / In Vivo mutation assay based on the endogenous Pig-a locus / Environ. Mol. Mutagen 49:256~264 google schola Cammerer Z / 2011 / Report on stage III: Pig-a mutation assays using N-ethyl-N-nitrosourea comparison with other in vivo genotoxicity endpoints / Environ. Mol. Mutagen 52:721~730 google schola

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