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저자정보
최기섭 ((주)녹십자종합연구소) 허동호 (가톨릭대학교(성의교정) 백신바이오연구소) 한승범 (가톨릭대학교(성의교정) 백신바이오연구소) 안동호 ((주)녹십자) 강규리 (가톨릭대학교) 김지안 (가톨릭대학교) 최보미 (GC녹십자) 김혜련 (GC녹십자) 강진한 (가톨릭대학교)
저널정보
대한백신학회 Clinical and Experimental Vaccine Research Clinical and Experimental Vaccine Research Vol.8 No.1
발행연도
2019.1
수록면
64 - 69 (6page)

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Purpose: Although the DTaP and Tdap vaccines used to prevent pertussis have been used for a long time, there is no standard method for measuring pertussis antigens. Therefore, this preliminary study was conducted to develop an enzyme-linked immunosorbent assay method using an animal model for measuring antibodies against pertussis toxin, the most important pertussis pathogenic antigen, in the sera of vaccinated mice. Materials and Methods: Bordetella pertussis Tohama phase I was cultured for 24-30 hours, and then pertussis toxin was purified from the culture medium by chromatography. Purified pertussis toxin was diluted in phosphate-buffered saline-coating buffer, and 100 µL of diluted pertussis toxin was added to each well and reacted at room temperature for 4 hours. Positive serum was diluted to 1/1,250-1/80,000 and negative serum was diluted to 1/50 to determine the coating concentration with the optimal signal/noise ratio. Optimal test conditions were confirmed from the dilution factors of the secondary antibody and streptavidin horseradish peroxidase (SA-HRP). Results: Optimal conditions were as follows: 4 µg/mL for coating antigen; 1/40,000 for secondary antibody; and 1/1,000 for the SA-HRP dilution factor. Comparison of the sera obtained from mice treated with a developing vaccine and commercial vaccine with National Institute for Biological Standard and Control standard serum under the established conditions showed the following results: 1,300.62, 534.94, and 34.85, respectively. Conclusion: The method developed in this study is suitable for measuring anti-pertussis toxin antibodies and may be applicable for clinical sample analysis or indirect diagnosis of pertussis.
#Bordetella pertussis #Enzyme-linked immunosorbent assay #Murine #Whooping cough

목차

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참고문헌 (12)

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Lee JH / 1997 / Pertussis antibodies in the sera of children after acellular pertussis vaccination / J Korean Pediatr Soc 40:167~172 google schola Kwon HJ / 2017 / Assessment of safety and efficacy against Bordetella pertussis of a new tetanus-reduced dose diphtheria-acellular pertussis vaccine in a murine model / BMC Infect Dis 17:247 google schola 최의윤 / 2011 / 국내 DTaP 백신 1차 및 2차 추가 접종 후 면역원성과 안전성 평가 / 대한의사협회지 54(9):979~987 dbpia Gaines Das R / 2001 / International collaborative study : evaluation of proposed International Reference Reagent of pertussis antiserum(mouse)97/642 / Biologicals 29:137~148 google schola Dalby T / 2010 / Antibody responses to pertussis toxin display different kinetics after clinical Bordetella pertussis infection than after vaccination with an acellular pertussis vaccine / J Med Microbiol 59(Pt 9):1029~1036 google schola

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