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자료유형
학술저널
저자정보
저널정보
한국미생물생명공학회 Journal of Microbiology and Biotechnology Journal of Microbiology and Biotechnology 제18권 제3호
발행연도
2008.1
수록면
449 - 456 (8page)

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Phenotypic screening for bile salt hydrolase (BSH) activity was performed on Lactobacillus acidophilus PF01 isolated from piglet feces. A gene encoding BSH was identified and cloned from the genomic library of L. acidophilus PF01. The bsh gene and surrounding regions were characterized by nucleotide sequence analysis and were found to contain a single open reading frame (ORF) of 951 nucleotides encoding a 316 amino acid protein. The potential bsh promoter region was located upstream of the start codon. The protein deduced from the complete ORF had high similarity with other BSHs, and four amino acid motifs located around the active site, FGRNXD, AGLNF, VLTNXP, and GXGXGXXGXPGD, were highly conserved. The bsh gene was cloned into the pET21b expression vector and expressed in Escherichia coli BLR(DE3) by induction with 0.1mM of isopropylthiogalactopyranoside. The BSH enzyme was purified with apparent homogeneity using a Ni2+-NTA agarose column and characterized. The overexpressed recombinant BSH enzyme of L. acidophilus PF01 exhibited hydrolase activity against tauroconjugated bile salts, but not glycoconjugated bile salts. It showed the highest activity against taurocholic acid. The maximum BSH activity occurred at approximately 40oC. The enzyme maintained approximately 70% of its maximum activity even at 60oC, whereas its activity rapidly decreased at below 37oC. The optimum pH was 6, and BSH activity was rapidly inactivated below pH 5 and above pH 7.
#Lactic acid bacteria #Lactobacillus acidophilus #bile salt hydrolase

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Ahn, Y. T. / 2002 / Characterization of Lactobacillus acidophilus isolated from piglets and chicken. Asian Aust. J. Anim / Sci 15 : 1790 ~ 1797 google schola Begley, M. / 2006 / Bile salt hydrolase activity in probiotics. Appl. Environ / Microbiol 72 : 1729 ~ 1738 google schola Buck, L. M. / 1994 / Comparisons of freshly isolated strains of Lactobacillus acidophilus of human intestinal origin for ability to assimilate cholesterol during growth. J. D google schola Burr, T. / 2000 / DNA sequence elements located immediately upstream of the -10 hexamer in Escherichia coli promoters: A systematic study / Nucleic Acids Res 28 : 1864 ~ 1870 google schola Christiaens, H. / 1992 / Cloning and expression of a conjugated bile acid hydrolase gene from Lactobacillus plantarum by using a direct plate assay. Appl. Environ / Microbiol google schola

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