Saccharomyces cerevisiae에서 Cycloinulooligosaccharide Fructanotransferase 유전자의 표층 발현

김현진; 이재형; 김현철; 김연희; 권현주; 김병우; 남수완

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자료유형: 학술저널

저자정보: 김현진 이재형 김현철 김연희 권현주 김병우 남수완

저널정보: 한국생명과학회 생명과학회지 생명과학회지 제17권 제2호

발행연도: 2007.2

수록면: 241 - 247 (7page)

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Paenibacillus macerans 유래의 cycloinulooligosaccharide fructanotransferase (CFTase) 유전자(cft, 2832 bp, 103.8 kDa)를 효모 표층발현 vector인 pCTcon (GAL1 promoter)에 subcloning 하였다. 구축된 pCTECFTN (9.0 kb)를 숙주세포인 S. cerevisiae EBY100에 형질전환한 후, uracil이 결핍된 배지와 inulin 함유배지에서 선별하였다. cft 유전자는 GAL1 promoter에 의해 효모 형질전환체에서 성공적으로 발현되었다. inulin으로부터 cyclofructans (CFs)로 생산하는 효소적 능력으로부터 표층발현 유무를 확인하였다. YPDG배지에서 48시간 배양 후 분획한 균체는 5.52 unit/ℓ의 할성을 보였다. CF 생산을 위한 효소의 최적 반응 조건으로 pH 8.0, 반응온도 50℃, 기질농도 5%, 기질은 Jerusalem artichoke로 최적화하였다. Dahlia, Chicory, Jerusalem artichoke 등의 inulin과 표층 발현 CFTase 효소반응 결과, cycloinulohexaose (CF6), cycloinuloheptaose (CF7), 그리고 cycloinulooctaose (CF8)이 생성되었고, 이 중에서 CF6가 주 생성물이었다.

#Cycloinulooligosaccharide fructanotransferase #Saccharomyces cerevisiae #cell surface display #cyclofructan #inulin

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