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논문 기본 정보

자료유형
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저자정보
저널정보
대한진단검사의학회 Annals of Laboratory Medicine Annals of Laboratory Medicine 제28권 제2호
발행연도
2008.1
수록면
95 - 102 (8page)

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Background : Tuberculosis (TB) remains an important cause of morbidity and mortality throughout the world. The surge of TB has been accompanied by an increase in multi-drug-resistant tuberculosis (MDR-TB). In this study, we developed a denaturing HPLC (DHPLC) method for detecting rpoB gene mutation as a rifampin resistance based on sequence. Methods : In this study, we used 99 mycobacterial isolates grown in Ogawa media. At first, we used a PCR method that can amplify the 235 bp and 136 bp rpoB DNAs of Mycobacterium tuberculosis complex (MTB) and Non-tuberculous mycobacteria (NTM). And then, PCR-restriction fragment length polymorphism (RFLP) of rpoB DNA (342 bp), which comprises the RifT region, was used for the differential identification of Mycobacteria. Finally, we detected these amplicons by DHPLC, compared to PCR-RFLP results, and performed sequencing. Results : Among 99 mycobacterial isolates, 80 (81%) were MTB and 19 (19%) were NTM. NTM were identified to 7 different species by DHPLC and PCR-RFLP. rpoB mutation was detected in 9 (11%) of the MTB specimens. These results were confirmed by using sequencing. Conclusions : DHPLC provided a rapid, simple, and automatable performance for detection of rifampin resistant Mycobacterium tuberculosis complex and would be helpful as a supplemental method in high-throughput clinical laboratories. (Korean J Lab Med 2008;28:95-102)
#Tuberculosis #Multi-drug-resistant tuberculosis #MDR-TB) #Non-tuberculous mycobacteria #NTM) #Denaturing high performance liquid chromatography #DHPLC)

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Barnes PF / 1991 / Tuberculosis in patients with human immuno-deficiency virus infection / N Engl J Med 324 : 1644 ~ 1650 google schola Cantwell MF / 1994 / Onorato IM. Epidemiology of tuberculosis in the United States, 1985 through 1992 / JAMA 272 : 535 ~ 539 google schola Donnabella V / 1994 / Isolation of the gene for the beta subunit of RNA polymerase from rifampicin-resistant Mycobacterium tuberculosis and identification of new mutations / google schola Ellis LA / 2000 / A comparison of fluorescent SSCP and denaturing HPLC for high throughput mutation scanning / Hum Mutat 15 : 556 ~ 564 google schola Espinal MA / 2001 / Global trends in resistance to antituberculosis drugs. World Health Organization-International Union against Tuberculosis and Lung Disease Working Group o google schola

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