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RCAN1은 calcineurin을 억제하는 내인성 단백질로 calcineurin-NFATc1 신호전달 경로와 관련된 질환의 병인에 중요한 역할을 담당한다. 특히 RCAN1-4 아형 유전자의 경우 NFATc1 전사인자에 의해 조절된다. RANKL 자극은 calcineurin-NFATc1 경로로 파골세포 분화를 유도하는데, RCAN1과 파골세포의 분화에 관련된 연구는 보고된 바 없다. 따라서 본 연구는 RANKL 처리에 의해 파골세포 분화가 유도될 때 RCAN1이 calcineurin-NFATc1 경로에 미치는 영향을 in vitro에서 조사했다. 마우스로부터 분리한 골수단핵세포에 RANKL을 처리하여 파골세포 분화를 유도했다. RANKL 처리 후 조사 대상 유전자의 mRNA 발현과 단백질 발현을 각각 RT-PCR과 Western blot로써 측정했다. 마우스 RCAN1-4 vector를 파골전구세포인 RAW 264.7 단핵세포주와 골수단핵세포에 형질도입(transfection)시켜 RCAN1-4 유전자의 과발현을 유도했다. 형질도입 후 파골세포 분화의 형태적 변화는 TRAP염색을 통해 관찰했다. RANKL 처리 후 NFATc1, calcineurin, RCAN1-4 mRNA 발현은 크게 증가했다. 단백질 발현의 경우 NFATc1과 RCAN1은 증가했으나 calcineurin은 대조군과 차이가 없었다. RCAN1-4 유전자의 과발현 유도 시 RCAN1-4 mRNA는 크게 증가되었으나 RCAN1 단백질 발현은 증가되지 않았다. 특히 RANKL 존재 시 RCAN1 유전자를 knock-down시켜도 RCAN1 발현은 정상적으로 유지되었다. 한편, NFATc1 발현은 과발현 유도시 감소했고 knock-down 유도 시 증가하는 경향을 보였다. RCAN1-4 유전자 과발현을 유도한 골수단핵세포에서 배양 5일 후 파골세포 분화는 대조군과 차이가 없었다. 이러한 결과는 RANKL에 의한 파골세포 분화 시 RCAN1이 calcineurin-NFATc1 경로를 통해 파골세포 분화에 미치는 영향은 제한적일 것으로 사료된다.
목차
서론
재료 및 방법
결과
고찰
References
초록
참고문헌 (28)
참고문헌 신청
1. [학술지(정기간행물)] - Bhoiwala, D. L. / 2011 / The calcineurin inhibitor RCAN1 is involved in cultured macrophage and in vivo immune response / FEMS Immunol. Med. Microbiol 61 : 103 ~ 113
2. [학술지(정기간행물)] - Blair, H. C. / 1989 / Osteoclastic bone resorption by a polarized vacuolar proton pump / Science 245 : 855 ~ 857
3. [학술지(정기간행물)] - Bush, C. R. / 2007 / Functional genomic analysis reveals cross-talk between peroxisome proliferator-activated receptor gamma and calcium signaling in human colorectal cancer cells / J. Biol. Chem 282 : 23387 ~ 23401
4. [학술지(정기간행물)] - Cano, E. / 2005 / Depolarization of neural cells induces transcription of the Down syndrome critical region 1 isoform 4 via a calcineurin/nuclear factor of activated T cells-dependent pathway / J. Biol. Chem 280 : 29435 ~ 29443
5. [학술지(정기간행물)] - Corsi, M. M. / 2003 / Proapoptotic activated T-cells in the blood of children with Down's syndrome : relationship with dietary antigens and intestinal alterations / Int. J. Tissue React 25 : 117 ~ 125
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5. [학술지(정기간행물)] - Corsi, M. M. / 2003 / Proapoptotic activated T-cells in the blood of children with Down's syndrome : relationship with dietary antigens and intestinal alterations / Int. J. Tissue React 25 : 117 ~ 125
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