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초고온성 세균인 Thermotoga maritima로부터 β-glucosidase 유전자를 클로닝한 후 대장균 숙주에서 발현시켰다. 이 효소는 salicin, arbutin, ρNPG과 같은 탄소원의 β-글루코시드 결합을 가수분해하였다. 721개의 아미노산을 암호화하는 2,166 bp의 DNA 염기서열로된 유전자이였다. 다른 β-glucosidase 효소들과 단백질 유사성을 비교한 결과 glycosyl hydrolase family 3에 속하였으며 MUG-nondenaturing PAGE와 SDS-PAGE에 의해 확인된 단백질의 크기는 약 81 kDa이었다. 효소활성은 pH 7.0, 80℃에서 가장 높은 활성을 나타냈으며 이 효소의 아미노산 서열에 있는 두 개의 아미노산 잔기 (232번 글루탐산과 242번 아스파르트산 잔기)를 알라닌으로 치환시켜 활성이 없어지는 것으로 보아 이 두 잔기가 효소활성에 중요한 역할을 하는 것으로 추정된다.
목차
Introduction
Materials and Methods
Results
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References
초록
참고문헌 (47)
참고문헌 신청
Bauer, M. W., E. J. Bylina, R. V. Swanson and R. M. Kelly. 1996. Comparison of a β-glucosidase and a β-mannosidase from the hyperthermophilic archaeon Pyrococcus furiosus. J. Biol. Chem. 271, 23749-23755.
Bibel, M., C. Brettl, U. Gosslar, G. Kriegshauser and W. Liebl. 1998. Isolation and analysis of genes for amylolytic enzymes of the hyperthermophilic bacterium Thermotoga maritima. FEMS Microbiol. Lett. 158, 9-15.
Bradford, M. M. 1976. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal. Biochem. 72, 248-254.
Bragger, J. M., R. M. Daniel, T. Coolbear and H. W. Morgan. 1989. Very stable enzymes from extremely thermostable archaebacteria and eubacteria. Appl. Microbiol. Biotechnol. 31, 556-561.
Bronnenmeier, K., A. Kern, W. Liebl and W. L. Staudenbauer. 1995. Purification of Thermotoga maritima enzymes for the degradation of cellulosic materials. Appl. Environ. Microbiol. 61, 1399-1407.
Bibel, M., C. Brettl, U. Gosslar, G. Kriegshauser and W. Liebl. 1998. Isolation and analysis of genes for amylolytic enzymes of the hyperthermophilic bacterium Thermotoga maritima. FEMS Microbiol. Lett. 158, 9-15.
Bradford, M. M. 1976. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal. Biochem. 72, 248-254.
Bragger, J. M., R. M. Daniel, T. Coolbear and H. W. Morgan. 1989. Very stable enzymes from extremely thermostable archaebacteria and eubacteria. Appl. Microbiol. Biotechnol. 31, 556-561.
Bronnenmeier, K., A. Kern, W. Liebl and W. L. Staudenbauer. 1995. Purification of Thermotoga maritima enzymes for the degradation of cellulosic materials. Appl. Environ. Microbiol. 61, 1399-1407.
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