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Thermotoga neapolitana 유래 내열성 4-알파-글루칸전이효소(MgtA)가 산업적 응용성을 지닌 싸이클로아밀로스를 생산할 수 있는지를 검사하기 위하여 그 유전자를 클로닝하고 대장균에서 발현시켰다. MgtA는 HiTrap Q와 Sephacryl S-200 분배 크로마토그래피를 이용하여 순수한 형태로 정제되었으며, SDS-PAGE를 통하여 분자량이 약 52 kDa으로 아미노산서열로부터 계산된 분자량과 일치하였다. 효소활성의 최적 pH와 온도는 6.5와 85℃였으며 알파1,4결합을 갖는 글루칸의 1,4결합을 효율적으로 가수분해함과 동시에 작은 크기의 올리고당을 말토덱스트린에 전이하는 전이활성을 가지고 있었다. 그러나 플루란, 글리코겐 및 1,4결합 이외의 다른 알파결합을 갖는 글루칸에는 활성을 나타내지 않았다. MgtA는 말토트리오스를 말토올리고당으로 전환할 수 있는 능력에서 그렇지 못한 Thermotoga maritima 의 효소와 구별할 수 있었으며, 반응 후 glucoamylase의 처리결과로부터 그 전이산물이 싸이클로아밀로스 대신에 긴 연쇄상의 말토올리고당을 생산하는 효소로 확인할 수 있었다.
목차
Introduction
Materials and Methods
Results and Discussion
Acknowledgement
References
초록
참고문헌 (25)
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1. [학술지(정기간행물)] - Berezina, O. V. / 1999 / Genes and properties of thermostable 4-α-glucanotransferase of Thermotoga neapolitana / Mol. Biol 33 : 801 ~ 806
2. [학술지(정기간행물)] - Bhuiyan, S. H. / 2003 / A cycloamylose-forming hyperthermostable 4-α-glucanotransferase of Aquifex aeolicus expressed in Escherichia coli / J. Mol. Catal. B: Enzym 22 : 45 ~ 53
3. [학술지(정기간행물)] - Bibel, M. / 1998 / Isolation and analysis of genes for amylolytic enzymes of the hyperthermophilic bacterium Thermotoga maritima / FEMS Microbiol. Lett 158 : 9 ~ 15
4. [학술지(정기간행물)] - Boos, W / 1998 / Maltose/maltodextrin system of Escherichia coli: Transport, metabolism, and regulation / Microbiol. Mol. Biol. Rev 62 : 204 ~ 229
5. [단행본] - Coutinho, P. M / 1999 / Carbohydrate-active enzymes: An integrated database approach, in Recent Advances in Carbohydrate Bioengineering, In The Royal Society of Chemistry, In Carbohydrate-active enzymes: An integrated database approach, in Recent Advances in Carbohydrate Bioengineering / The Royal Society of Chemistry : 3 ~ 12
2. [학술지(정기간행물)] - Bhuiyan, S. H. / 2003 / A cycloamylose-forming hyperthermostable 4-α-glucanotransferase of Aquifex aeolicus expressed in Escherichia coli / J. Mol. Catal. B: Enzym 22 : 45 ~ 53
3. [학술지(정기간행물)] - Bibel, M. / 1998 / Isolation and analysis of genes for amylolytic enzymes of the hyperthermophilic bacterium Thermotoga maritima / FEMS Microbiol. Lett 158 : 9 ~ 15
4. [학술지(정기간행물)] - Boos, W / 1998 / Maltose/maltodextrin system of Escherichia coli: Transport, metabolism, and regulation / Microbiol. Mol. Biol. Rev 62 : 204 ~ 229
5. [단행본] - Coutinho, P. M / 1999 / Carbohydrate-active enzymes: An integrated database approach, in Recent Advances in Carbohydrate Bioengineering, In The Royal Society of Chemistry, In Carbohydrate-active enzymes: An integrated database approach, in Recent Advances in Carbohydrate Bioengineering / The Royal Society of Chemistry : 3 ~ 12
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