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저널정보
한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 한국미생물·생명공학회지 제47권 제4호
발행연도
2019.1
수록면
662 - 666 (5page)

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본 연구에서는 Saccharomyces cerevisiae를 이용해서neoagarobiose hydrolase (NABH)를 효율적으로 생산하기위한 NABH558 유전자 발현시스템을 구축하였다. ADH1 promoter와 GAL10 promoter 하류에 NABH558 유전자를가진 pAMFα-NABH plasmid와 pGMFα-NABH plasmid 는 S. cerevisiae 2805 균주에 형질전환되었다. 2805/ pAMFα-NABH 균주는 YPD (2% dextrose) 배지에서 가장높은 NABH 효소 활성(0.069 unit/ml/DCW)을 보였고, 2805/pGMFα-NABH 균주의 경우는 배지의 조성과 상관없이 비슷한 수준의 NABH 활성(0.02−0.027 unit/ml/DCW)을 보였다. RT-PCR을 통한 NABH558 유전자의 transcription level은 NABH 활성 증가에 따라 비슷한 수준으로 증가되었음을 확인할 수 있었다. 또한 재조합균주에서 생산된 NABH 는 agarose를 galactose와 AHG로 분해하였다. 따라서NABH558 유전자의 발현에는 ADH1 promoter를 사용하는것이 더 효율적이며 GAL10 promoter와 비교해서 최대 3배정도 높은 활성의 재조합 NABH를 생산할 수 있음을 알 수있었다.

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