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논문 기본 정보

자료유형
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저자정보
저널정보
한국미생물생명공학회 Journal of Microbiology and Biotechnology Journal of Microbiology and Biotechnology 제26권 제3호
발행연도
2016.1
수록면
461 - 468 (8page)

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In recent years, various naturally occurring defence peptides such as plectasin have attracted considerable research interest because they could serve as alternatives to antibiotics. However, the production of plectasin from natural microorganisms is still not commercially feasible because of its low expression levels and weak stability. A tandemly arrayed plectasin gene (1,002 bp) from Pseudoplectania nigrella was generated using the isoschizomer construction method, and was inserted into the pPICZαA vector and expressed in Pichia pastoris. The selected P. pastoris strain yielded 143 μg/ml recombinant plectasin (Ple) under the control of the methanol-inducible alcohol oxidase 1 (AOX1) promoter. Ple was estimated by SDS-PAGE to be 41 kDa. In vitro studies have shown that Ple efficiently inhibited the growth of several gram-positive bacteria such as Streptococcus suis and Staphylococcus aureus. S. suis is the most sensitive bacterial species to Ple, with a minimum inhibitory concentration (MIC) of 4 μg/ml. Importantly, Ple exhibited resistance to pepsin but it was quite sensitive to trypsin and maintained antimicrobial activity over a wide pH range (pH 2.0 to 10.0). P. pastoris offers an attractive system for the cost-effective production of Ple. The antimicrobial activity of Ple suggested that it could be a potential alternative to antibiotics against S. suis and S. aureus infections.
#Plectasin #Expression #Purification #Pichia pastoris #Antimicrobial activity

목차

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Athmaram TN / 2012 / Influence of copy number on the expression levels of pandemic influenza hemagglutinin recombinant protein in methylotrophic yeast Pichia pastoris / Virus Genes 45:440~451 google schola Barton MD / 2000 / Antibiotic use in animal feed and its impact on human health / Nutr. Res. Rev 13:279~299 google schola Brinch KS / 2009 / Plectasin shows intracellular activity against Staphylococcus aureus in human THP-1 monocytes and in a mouse peritonitis model / Antimicrob. Agents Chemother 53:4801~4808 google schola Buckholz RG / 1991 / Yeast systems for the commercial production of heterologous proteins / Nat. Biotechnol 9:1067~1072 google schola Cereghino JL / 2000 / Heterologous protein expression in the methylotrophic yeast Pichia pastoris / FEMS Microbiol. Rev 24:45~66 google schola

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