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Changes of CP4 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphatesynthase (CP4 EPSPS) in the glyphosate-tolerant RoundupReady soybean were examined using purified CP4 EPSPSproduced in cloned Escherichia coli as a control. CP4 EPSPSin genetically modified soybean was detected by twodimensionalgel electrophoresis (2-DE) and identified bymatrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight massspectrometry (MALDI-TOF MS) and electrospray ionizationtandem mass spectrometry (ESI-MS/MS) with databases.CP4 EPSPS in soybean products was resolved on 2-DE byfirst isoelectric focusing (IEF) based on its characteristic pI of5.1, followed by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gelelectrophoresis (SDS-PAGE) based on its molecular mass of47.5 kDa. We quantified various percentages of soybean CP4EPSPS. The quantitative analysis was performed using a 2Dsoftware program on artificial gels with spots varying inGaussian volumes. These results suggested that 2-DE imageanalysis could be used for quantitative detection of GMsoybean, unlike Western blotting.

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