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The effects of coexpression of GroEL/ES andDnaK/DnaJ/GrpE chaperones on the productivity of the solubleform of human granulocyte colony stimulating factor (hGCSF)in E. coli were examined. Recombinant hG-CSF proteinwas coexpressed with DnaK/DnaJ/GrpE or GroEL/ES chaperonesunder the control of the araB or Pzt-1 promoter, respectively.The optimal concentration of L-arabinose for the expressionof DnaK/DnaJ/GrpE was found to be 1 mg/ml. When Larabinosewas added at OD600=0.2 (early-exponential phase),soluble hG-CSF production was greatly increased. In addition,it was observed that the DnaK/DnaJ/GrpE and GroEL/ESchaperones had no synergistic effects on preventing aggregationof hG-CSF protein. Consequently, by coexpression of theDnaK/DnaJ/GrpE chaperone, the signal intensity of the hGCSFprotein band in the soluble fraction of cell lysate wasincreased from 3.5% to 13.9%, and Western blot analysis alsorevealed about a 4-5-fold increase of production of solublehG-CSF over the non-induction case of DnaK/DnaJ/GrpE.

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