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저널정보
한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 한국미생물·생명공학회지 제32권 제2호
발행연도
2004.1
수록면
135 - 141 (7page)

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인간 과립구 성장인자(hG-CSF)는 골수에서 생산되는 단백질로 호중구의 분화 및 생성을 촉진시키는 역할을 한다. 현재 재조합 hG-CSF는 암화학요법에 의한 호중구감소증, 골수이식시 호중구 감소증, 재생불량성 빈혈에 수반되는 호중구 감소증 등으로 적응증이 확대되고 있다. 본 연구에서는 OmpA signal sequence를 삽입하여 인간 과립구 성장인자(hG-CSF)가 분비발현되도록 고안된 T7 promoter에 의하여 발현되는 pYRC1 발현벡터를 제조하였다. E. coli BL21 (pYRC1) 발현시 37oC에서 배양하는 경우 많은 양의 봉입체(aggregates)를 형성한다. 이에 비하여 10 g/l glucose를 포함하는 변형된 MBL 배지에서 10 mM IPTG를 유도물질로 7 시간동안 25oC에서 배양하였을 때 전체 periplasm 단백질의 15%가 soluble rhG-CSF이었다. 또한, 유가식 배양방법을 사용하여 E. coli BL21(pYRC1)에서 soluble rhG-CSF의 생산 조건을 조사하였다. 유가식 배양에서 rhG-CSF의 발현량이 비증식속도를 0.43 h-1에서 0.14 h-1으로, 유도 배양시간을 최적화함으로써 rhG-CSF의 발현량이 4.4 mg/l에서 24 mg/l로 증가하였다.
#soluble recombinant human granulocyte colony stimulating factor #specific growth rate #fed-batch culture

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/ 1949 / Dinitrosalicylic method for glucose In Laboratory of Biological Chemistry : 38 ~ 39 google schola / 1979 / Electrophoretic transfer of proteins from polyacrylamide gels to nitrocellulose sheets : 4350 ~ 4355 google schola / 1985 / Isolation and purification of protein granules from Escherichia coli cells overproducing bovine growth hormone : 151 ~ 154 google schola / 1985 / Synthesis and secretion of human epidermal growth factor by Escherichia coli taka (ri) : 7212 ~ 7216 google schola / 1986 / Molecular cloning and expression of cDNA for human granulocyte colony stimulating factor : 415 ~ 319 418 google schola

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