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A gene encoding a putative glycogen-debranchingenzyme in Sulfolobus shibatae (abreviated as SSGDE) wascloned and expressed in Escherichia coli. The recombinantenzyme was purified to homogeneity by heat treatment andNi-NTA affinity chromatography. The recombinant SSGDEwas extremely thermostable, with an optimal temperature at85oC. The enzyme had an optimum pH of 5.5 and was highlysuggested that it possesses characteristics of both amylo-1,6-glucosidase and α-1,4-glucanotransferase. SSGDE clearlyhydrolyzed pullulan to maltotriose, and 6-O-α-maltosyl-β-cyclodextrin (G2-β-CD) to maltose and β-cyclodextrin. Atthe same time, SSGDE transferred maltooligosyl residues tothe maltoligosaccharides employed, and maltosyl residues toG2-βfollowed in a decreasing order by glycogen, pullulan, andamylose. Therefore, the present results suggest that the glycogen-debranching enzyme from S. shibatae may have industrialapplication for the efficient debranching and modification ofstarch to dextrins at a high temperature.

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