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저자정보
저널정보
대한골다공증학회 OSTEOPOROSIS OSTEOPOROSIS 제7권 제2호
발행연도
2009.1
수록면
111 - 121 (11page)

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목적: 조골세포 분화 유도 세포주인 MC3T3-E1세포를 이용하여 조골세포의 증식과 분화과정 동안의 alendronate의 작용기전에 대해 조사하고자 한다. 방법: MC3T3-E1세포를 FBS가 포함된 DMEM, 배양액에 배양하면서 alendronate를 다양한 농도(10-9 M, 10-8 M, 10-7 M, 10-6 M, 10-5 M, 10-4 M)로 첨가하고 1, 2, 3일 동안 배양한 후 MTT 분석, alkaline phosphatase(ALP) 활성도 및 RT-PCR 방법을 이용한 ALP, osteocalcin(OCN), collagen I α1(Col 1), inhibitor of differentiation(Id) 및 cathepsin K(CTSK) 등의 조골세포와 파골세포 분화 관련 유전자의 발현을 조사하였다. Id 유전자의 발현 증가에 관여하는 전사인자를 TRANSFEC program을 이용하여 동정하고 이들 전사인자가 Id 유전자의 발현에 미치는 효과를 promoter 분석을 통하여 조사하였다. 결과: Alendronate의 농도에 따른 세포 독성은 없었다. ALP 활성은 MC3T3-E1에서는 ALP 활성이 10-8 M에서 48시간까지 급격하게 증가되나 10-8 M 이상의 농도에서는 시간경과에 상관없이 급격히 감소되었다. ALP, Col 1 및 OCN의 유전자 발현은 alendronate 처리 24시간까지는 두 세포주 모두에서 alendronate의 농도가 감소함에 따라 증가하는 경향을 보였다. Id-1의 유전자의 발현은 대조군에 비해 10-6 M에서 증가하여 10-8 M까지 유지되었으나, Id-2는 alendronate 농도에 따라 점차적으로 증가하였으며, 72시간에서는 Id-1과 Id-2 유전자 모두 발현양이 감소하였다. Id 유전자 프로모터 내 전사인자 가운데 CREB와 C/EBP β는 Id 프로모터의 활성도를 각각 2배, 4배로 증가시켰으며, C/EBPβ와 alendronate를 병합 처리 시 Id-1 프로모터 활성도는 각각을 단독으로 처리했을 때보다 유의하게 증가하였다. 결론: 본 연구는 alendronate가 농도에 의존적으로 조골세포의 분화를 촉진시키고 있음을 보여주고 있으며, 이러한 alendronate에 의한 분화 촉진 효과는 C/EBPβ 전사인자와 상호 작용하여 Id 유전자의 발현 증가를 야기하고 있음을 시사하고 있다.
#알렌드로네이트 #조골세포 #증식 #분화 #Alendronate #Osteoblast #Proliferation #Differentiation

목차

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참고문헌 (23)

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2000 / 1991 / Bisphosphonate action. Alendronate localization in rat bone and effects on osteoclast ultrastructure / J Clin Invest 88 : 2095 ~ 2105 google schola Alakangas A / 2002 / Alendronate disturbs vesicular trafficking in osteoclasts / Calcif Tissue Int 70 : 40 ~ 47 google schola Aubin JE / 1998 / Bone stem cells / J Cell Biochem 30 : 73 ~ 82 google schola Canvassieux PM / 1997 / Histomorphometric assessment of the long-term effects of alendronate on bone quality and remodeling in patients with osteoporosis / J Clin Invest 100 google schola Devogelaer JP / 2000 / Treatment of bone diseases with bisphosphonates, excluding osteoporosis / Curr Opin Rheumatol 12 : 331 ~ 335 google schola

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