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Runx2는 runt family에 속하는 전사 인자로 조골 세포의 분화와 골격 형성에 아주 중요한 역할을 담당하고 있는 것으로 알려져 있다. Runx2는 스스로의 발현뿐만 아니라 조골 세포에 중요한 역할을 하는 다른 유전자들의 발현들도 조절하여 조골 세포의 분화를 촉진하여 골 형성을 유도한다. 그러나, Runx2를 조절하는 신호 전달 기전에 대해서는 거의 알려진 바가 없어, 본 연구에서는 조골 세포의 성장 및 분화를 촉진시킨다고 알려진 Protein Kinase C (PKC) pathway와 Mitogen-activated Protein Kinase (MAPK) pathway가 Runx2에 미치는 영향을 관찰하였다. PKC pathway의 활성화가 Runx2의 전사 활성 및 발현에 미치는 영향을 알아보기 위해 6XOSE2-C2C12 cell에 PKC pathway의 activator인 PMA (phorbol 12-myristate 13-acetate)를 처리하여 luciferase assay와 Northern blot analysis를 시행한 결과 Runx2의 전사 활성 및 발현이 증가하는 것을 관찰할 수 있었다. 또한 C2C12 cell에 osteopontin 또는 osteocalcin promotor를 transient transfection 후 PMA를 처리한 결과 골 표지 유전자 (osteopontin; OP, osteocalcin; OC)의 전사가 증가하였다. MAPK pathway의 활성제인 okadaic acid를 6XOSE2-C2C12 cell에 농도별로 처리하여 luciferase activity를 측정한 결과 MAPK이 활성화됨에 따라 Runx2의 전사 활성이 증가하는 것을 관찰하였고, osteopontin 또는 osteocalcin promotor가 transient transfection된 C2C12 cell에 okadaic acid를 처리한 결과 OP, OC의 전사가 증가하였다. PKC pathway가 MAPK pathway를 경유하여 Runx2의 전사 활성을 조절하는지 알아보기 위하여 6XOSE2-C2C12 cell에 PD98059 (Erk pathway inhibitor) 또는 SB203580 (P38 pathway inhibitor)를 첨가하여 MAPK pathway를 차단시킨 1 시간 뒤에 PMA를 처리하여 luciferase activity를 측정한 결과 MAPK pathway가 차단된 경우에서는 PMA에 의한 전사 활성 증가 정도가 감소하였다. 이상의 실험 결과들로 다음과 같은 사실들을 알 수 있었다.- PKC pathway의 활성화는 Runx2의 전사 활성 및 발현을 증가시키고 이로 인해 그의 영 향을 받는 골 표지 유전자 (osteopontin, osteocalcin)의 전사도 증가한다.- MAPK pathway의 활성화는 Runx2 및 골 표지 유전자 (osteopontin, osteocalcin)의 전사 활성을 증가시킨다.- PKC pathway는 MAPK pathway를 경유하여 Runx2의 전사 활성을 조절한다.
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