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저자정보
송미나 (인하대학교) 전수환 (인하대학교) 권준영 (인하대학교) 최성훈 (인하대학교) 김동일 (인하대학교)
저널정보
한국생물공학회 KSBB Journal KSBB Journal 제24권 제3호
발행연도
2009.7
수록면
246 - 252 (7page)

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본 연구에서는 형질전환된 벼 세포를 이용하여 자가면역 질환의 치료제인 human cytotoxic T-lymphocyte antigen 4-immunoglobulin (hCTLA4Ig)을 생산하였고, RAmy3D promoter와 RAmy1A signal peptide를 사용하여 당 고갈시에 목적 단백질의 발현과 배지로의 분비를 유도하였다. 이 시스템의 문제점은 당 고갈에 의해 목적 단백질의 생산이 유도되기 때문에 에너지원이 없어 세포의 사멸, 이로인한 배지내로의 protease 분비를 유발하게 된다. 이것은 목적 단백질의 안정성 저해와 궁극적으로는 생산성의 손실을 일으킨다. 따라서 세포를 보호하여 사멸을 막는 효과가 있음이 보고된 proline을 첨가하여 생산성 증진 효과를 확인하고자 하였다. 4 mM의 proline을 첨가하여 배양하였을 때, 세포의 사멸 및 protease의 분비를 줄일 수 있었고 이는 결과적으로 hCTLA4Ig의 생산성 증진으로 이어졌다. 또한 단백질 안정제를 통하여 배지내로 분비된 hCTLA4Ig 의 안정화를 이루어 생산성을 높이고자 하였다. 0.01 g/L 의 gelatin을 적용하여 생산성 증진 효과를 확인하였으며, 이는 hCTLA4Ig의 안정화에 의한 것임을 알 수 있었다. Protease의 분비를 줄이기 위한 세포 보호와 protease의 공격을 막기 위한 hCTLA4Ig 보호를 통하여 형질전환된 벼 세포를 이용한 hCTLA4Ig의 안정성 및 생산성을 증대 시킬 수 있음을 확인하였다.
#Gelatin #hCTLA4Ig #proline #RAmy3D promoter #transgenic rice cell cultures

목차

Abstract
서론
재료 및 방법
결과 및 고찰
요약
REFERENCES

참고문헌 (14)

참고문헌 신청
1. [학술대회논문] - Becerra-Arteaga, A. / 2006 / Production, secretion, and stability of human secreted alkaline phosphatase in tobacco NT1 cell suspension cultures / Biotechnol. Prog. : 1643 ~ 1649 google schola 2. [학술지(정기간행물)] - Yu, S. M. / 1991 / Metabolic derepression of α-amylase gene expression in suspension-cultured cells of rice / J. Biol. Chem. 266 : 21131 ~ 21137 google schola 3. [학술지(정기간행물)] - Mitsunaga, S. / 1994 / Sequence-specific interactions of a nuclear protein factor with the promoter region of rice gene for alpha-amylase, RAmy3D / Nucleic Acids Res. 423 : 81 ~ 85 google schola 4. [학술지(정기간행물)] - Terashima, M. / 1999 / Production of functional human a1-antitrypsin by plant cell culture / Appl. Microbiol. Biotechnol. 52 : 516 ~ 523 google schola 5. [학술지(정기간행물)] - Lui, V. C. H. / 2003 / Mammary gland-specific secretion of biologically active immunosuppressive agent cytotoxic-T-lymphocyte antigen 4 human immunoglobulin fusion protein (CTLA4-IgG) in milk by transgenesis / J. Immunol. 277 : 171 ~ 183 google schola

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