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Corynebacterium ammoniagenes의 purF 유전자의 발현을 purF의 프로모터 추정 부위에 cat 유전자를 융합시킨 transcriptional fusion 플라스미드를 제작하여 분석하였다. 유전자 purF는 adenine과 guanine에 의해 20~30%의 전사 저해효과를 나타내지만, hypoxanthine에는 저해를 받지 않는 것으로 나타났다. 또한 purF의 발현은 대수기중반에 최대에 달한 후 정체기 후반부까지 일정한 것으로 나타났다. 동시에, C. glutamicum에서 사용되는 강력한 프로모터인 P180이 Escherichia coli의 Ptac보다 C. ammoniagenes에서 모든 성장 단계에서 40~50%의 향상된 프로모터 활성을 나타내었고 대수기 후반부에 최고 활성에 달해, C. ammoniagenes의 연구에도 활용 가능함을 확인하였다. DNA-affinity purification에 의해 C. ammoniagenes의 purF 프로모터에 결합하는 단백질로서 C. glutamicum의 Crp-family transcriptional regulator (NCgl0120)와 상동성이 높은 단백질을 검출하였다. 이 단백질은 크기가 40.1 kDa으로서 PAGE에서 관찰된 단백질 크기와 일치하였다. 이에 상응하는 C. ammoniagenes의 단백질은 400개의 아미노산으로 구성되어 있고, 42 kDa의 단백질을 만들며, pI는 4.9일 것으로 추정되었다. 이는 기존에 알려져 있는 E. coli 및 Bacillus subtilis의 PurR과 각각 14.1%, 15.8%의 아미노산 상동성을 보여, PurR과는 다른 종류의 단백질일 것으로 여겨진다.
목차
재료 및 방법
결과 및 고찰
감사의 말
참고문헌
ABSTRACT
참고문헌 (23)
참고문헌 신청
1. [학술지(정기간행물)] - Bradford,M.M / 1976 / A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding / Anal. Biochem. 72 : 248 ~ 254
2. [학술지(정기간행물)] - Chung, S.O. / 1996 / Genomic organization of purK and purE in Brevibacterium ammoniagenes ATCC 6872: purE locus provides a clue for genomic evolution / FEMS Microbiol. Lett. 137 : 265 ~ 268
3. [학술지(정기간행물)] - Cramer, A. / 2006 / Identification of RamA, a novel LuxR-type transcriptional regulator of genes involved in acetate metabolism of Corynebacterium glutamicum / J. Bacteriol. 188 : 2554 ~ 2567
4. [학술지(정기간행물)] - Demain,A.L / 2000 / Small bugs, big business: the economic power of the microbe / Biotechnol. Adv. 18 : 499 ~ 514
5. [학술지(정기간행물)] - Follettie, M.T. / 1993 / Gene structure and expression of the Corynebacterium flavum N13 ask-asd operon / J. Bacteriol. 175 : 4096 ~ 4103
2. [학술지(정기간행물)] - Chung, S.O. / 1996 / Genomic organization of purK and purE in Brevibacterium ammoniagenes ATCC 6872: purE locus provides a clue for genomic evolution / FEMS Microbiol. Lett. 137 : 265 ~ 268
3. [학술지(정기간행물)] - Cramer, A. / 2006 / Identification of RamA, a novel LuxR-type transcriptional regulator of genes involved in acetate metabolism of Corynebacterium glutamicum / J. Bacteriol. 188 : 2554 ~ 2567
4. [학술지(정기간행물)] - Demain,A.L / 2000 / Small bugs, big business: the economic power of the microbe / Biotechnol. Adv. 18 : 499 ~ 514
5. [학술지(정기간행물)] - Follettie, M.T. / 1993 / Gene structure and expression of the Corynebacterium flavum N13 ask-asd operon / J. Bacteriol. 175 : 4096 ~ 4103
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