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This study has developed Corynebacteriumammoniagenes (C. ammoniagenes) purine gene transcriptionalreporters (purF-lacZ and purE-lacZ) that function in Escherichiacoli (E. coli) DH5a. After transformation of a C. ammoniagenesgDNA library into E. coli cells harboring either purF-lacZ orpurE-lacZ, C. ammoniagenes clones were obtained that represspurF-lacZ and purE-lacZ gene expression. The potential purEand purF regulatory genes are homologous to the genesencoding transcription regulators, the regulatory subunit ofRNA polymerase, and genes for purine nucleotide biosynthesisof various bacteria. The C. ammoniagenes purE-lacZ andpurF-lacZ reporters were repressed by adenine and guaninewithin E. coli, indicating similarity in the regulatory mechanismof purine biosynthesis in C. ammoniagenes and E. coli. Generegulation of pur-lacZ by adenine and guanine was partlyabolished in cells expressing potential purine regulatorygenes, indicating functionality of the purine gene regulators inrepression of purE-lacZ and purF-lacZ. The purE-lacZ andpurF-lacZ reporters can be used for the screening of genesinvolved in the regulation of the de novo synthesis of thepurine nucleotides.

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