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이란희 (한국생명공학연구원) 김도영 (한국생명공학연구원) 한미경 (한국생명공학연구원) 오현우 (한국생명공학연구원) 함수진 (한국생명공학연구원) 박두상 (한국생명공학연구원) 배경숙 (한국생명공학연구원) 석대은 (충남대학교) 신동하 (인섹트바이오텍) 손광희 (한국생명공학연구원) 박호용 (한국생명공학연구원)
저널정보
한국미생물학회 미생물학회지 미생물학회지 45권 4호
발행연도
2009.12
수록면
332 - 338 (7page)

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꿀벌(Apis mellifera)의 장으로부터 xylan분해능이 우수한 세균 HY-20을 분리하였고, Bacillus 속으로 동정하였다. 분리균주 HY-20의 세포 외 GH11 xylanase (XylP) 유전자 (687-bp)는 25,522 Da의 분자량과 9.33의 pI 값을 갖는 228개의 아미노산으로 구성된 단백질을 인코딩하는 것으로 확인되었으며, 지금까지 특성규명이 이루어지지 않은 B. pumilus xylanase (GenBank accession no.: AY526092)의 아미노산 서열과 97%의 상동성을 보였다. pET-28a(+)/xylP를 포함하고 있는 Escherichia coli BL21 균주에서 과발현 된 His-tagged XylP (rXylP)는 cation exchange 및 gel permeation chromatography를 통해 순수하게 분리ㆍ정제 되었으며, 50℃의 온도와 pH 6.5 조건에서 반응할 때 birchwood xylan에 대해 가장 높은 가수분해 활성을 나타내었다. rXylP는 15분간 55℃에 노출될 때 본래 활성의 약 50%를 잃어버리는 전형적인 중온성 효소의 특성을 보였으며, Hg²? (1mM)와 N-bromosuccinimide (5mM)에 노출될 때 완전히 불활성화 되었고, Mn²? (1 mM), Fe²? (1mM) 및 sodium azide (5 mM)에 의해서는 활성이 약 10% 증가될 수 있는 것으로 밝혀졌다. 한편, rXylP는 xylose유래 다당류는 효율적으로 분해하였지만 PNP-sugar 유도체 및 glucose 유래 다당류는 분해하지 못하였다.

목차

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