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Yun Jeong Kim (국립보건연구원) Na-Ri Shin (국립보건연구원) Jeong-Hee Kim (국립보건연구원) So-Yeon Yoon (국립보건연구원) Gi-eun Rhie (국립보건연구원) Bong Su Kim (국립보건연구원) Hee-Bok Oh (국립보건연구원)
저널정보
대한미생물학회 JOURNAL OF BACTERIOLOGY AND VIROLOGY JOURNAL OF BACTERIOLOGY AND VIROLOGY Vol.38 No.3
발행연도
2008.9
수록면
119 - 125 (7page)

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A capture enzyme-linked immunosorbent assay (capture ELISA) was developed to detect Clostridium botulinum neurotoxin type A (BoNT/A) in assay buffer and human serum. The assay is based upon affinity-purified rabbit polyclonal and biotinylated monoclonal antibodies directed against the BoNT/A complex purified from C. botulinum ATCC19397. For the capture ELISA, the optimized amount (2 ㎍/㎖) of rabbit polyclonal antibody was immobilized on ELISA plates to detect BoNT/A (ranging from 0 to 500 ng/㎖), which was recognized by 2 μg/㎖ of the monoclonal antibody. From three independent repeated experiments, standard curves were linear over the range of 0~31.25 ng/㎖ BoNT/A and the coefficients (r²) ranged from 0.9951~0.9999 for all assays. The inter-variations were typically 0.50~6.93% and the specificity was confirmed by showing no cross-reactivity against BoNT/B and /E. The detection limit of capture ELISA was 0.488 ng/㎖, which was close to mouse LD50. In addition, application with BoNT/A-spiking human sera showed a possibility to detect BoNT/A with capture ELISA from the contaminated human sera. Taken together, the newly developed capture ELISA could serve as a rapid and sensitive screening tool for detecting BoNT/A simultaneously from massive specimens.
#BoNT/A #Capture ELISA #Biotinylated monoclonal antibody

목차

서론
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