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Kinesin-1은 kinesin superfamily (KIF) 단백질 중에서 처음으로 확인된 모터 단백질로 세포내 미세소관 의존하여 세포내 cargo를 수송한다. Kinesin-1은 두 개의 중쇄(KHC, 또는 KIF5)와 두 개의 경쇄(KLC)로 구성된다. KIF5A의 C-말단의 93개 아미노산은 KIF5B와 KIF5C의C-말단 꼬리 영역과는 상동성이 없다. 본 연구에서 우리는 KIF5A의 C-말단 영역과 특이적으로 결합하는 단백질을 분리하기 위해 효모 2-하이브리드 스크리닝을 하였다. 본 연구에서 우리는 KIF5A와 결합하는 단백질로 유비퀴틴화 경로 및 단백질 수송에 관여하는 어댑터 단백질로 기능하는 CUE 도메인을 가진 CUEDC2를 확인하였다. CUEDC2는 KIF5A의 C-말단 영역과 결합하지만, KIF5B, KIF3A 및KLC1과는 결합하지 않았다. KIF5A는 CUEDC2의 C-말단 영역과 특이적으로 결합하였지만, CUEDC2의 다른 isoform인 CUEDC1과는 결합하지 않았다. 또한, KIF5A와 CUEDC2의 결합은 글루타티온 S-트랜스퍼라제(GST) 풀다운으로 단백질간 결합을 확인하였다. HEK-293T 세포에서 myc-KIF5A와 FLAG-CUEDC2을 공동 발현되었을 때, CUEDC2는 kinesin-1과 공동 면역 침전되었고, myc-KIF5A와 EGFP-CUEDC2는 세포내의 같은 위치에서 발현하였다. 이러한 결과들은 kinesin-1에 의한 세포내 화물 수송에서 CUEDC2는 KIF5A에 결합하여 kinesin-1과 화물을 연결하는 어댑터 단백질 역할을 시사한다.
목차
Introduction
Materials and Methods
Results
Discussion
References
초록
참고문헌 (25)
참고문헌 신청
Donaldson, K. M., Yin, H., Gekakis, N., Supekm F. and Joazeiro, C. A. 2003. Ubiquitin signals protein trafficking via interaction with a novel ubiquitin binding domain in the membrane fusion regulator. Curr. Biol. 13, 258-262.
Glater, E. E., Megeath, L. J., Stowers, R. S. and Schwarz, T. L. 2006. Axonal transport of mitochondria requires milton to recruit kinesin heavy chain and is light chain independent. J. Cell Biol. 173, 545-557.
Goldstein, A. Y., Wang, X. and Schwarz, T. L. 2008. Axonal transport and the delivery of pre-synaptic components. Curr. Opin. Neurobiol. 18, 495-503.
Hirokawa, N., Niwa, S. and Tanaka, Y. 2010. Molecular motors in neurons: transport mechanisms and roles in brain function, development, and disease. Neuron 68, 610-638.
Jang, W. H., Jeong, Y. J., Choi, S. H., Kim, S. J., Urm, S. H. and Seog, D. H. 2014. Dynamin-1-like protein (Dnm1L) interaction with kinesin light chain 1 (KLC1) through the tetratricopeptide repeat (TPR) domains. Biosci. Biotechnol. Biochem. 78, 2069-207
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