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학술저널
저자정보
Amir Ghaffar Shahriari (Higher Education Center of Eghlid) Ali Niazi (Shiraz University) Maziar Habibi-Pirkoohi (Shahid Bahonar University of Kerman)
저널정보
대한백신학회 Clinical and Experimental Vaccine Research Clinical and Experimental Vaccine Research Vol.10 No.3
발행연도
2021.9
수록면
245 - 251 (7page)

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Purpose: Newcastle disease (ND) represents a major viral disease across the world which imposes high costs to poultry producers for vaccination. Hemagglutinin-neuraminidase (HN) and fusion (F) proteins are the major immunogenic epitopes of Newcastle disease virus and hence, have been the main targets for development of anti-ND vaccines. This paper reports transient expression of a synthetic gene composing of four tandem repeats of HN and three tandem repeats of F epitopes in maize leaves as initial step toward production of recombinant vaccine against ND. Materials and Methods: The synthetic gene was cloned in pBI121 plasmid to yield an expression vector. The vector was sophisticated by the addition of AUG codon, polyhistidine-tag, tobacco mosaic virus omega sequence, stop codon, and restriction sites. Leaf transformation was conducted by the agroinfiltration method. Molecular detection assays including polymerase chain reaction, reverse transcription-polymerase chain reaction and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) were carried out to evaluate transgene expression in infiltrated leaves of the corn plant. Results: The result obtained in this research revealed that the transgene was transcribed and translated in maize leaves only 48 hours after infiltration. In the second phase of the experiment, the expressed protein was injected into rabbits. The result of the ELISA assay indicated induction of immune response in the rabbits after injection with the heterologous protein. Conclusion: These results confirm the feasibility of agroinfiltration for transient gene expression of viral epitopes in monocot plants which naturally resist stable transformation by Agrobacterium tumefaciens. Practical implications of this finding are discussed in detail and some recommendations for future studies are proposed.
#Newcastle disease #Recombinant vaccine #Transient gene expression #Agroinfiltration #Maize

목차

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Shahriari AG / 2017 / Plant-based recombinant vaccine : fact or fiction / Galen Med J 6:268~280 google schola Kidokoro S / 2015 / Soybean DREB1/CBF-type transcription factors function in heat and drought as well as cold stress-responsive gene expression / Plant J 81:505~518 google schola Habibi-Pirkoohi M / 2015 / Recombinant vaccine production in green plants : state of art / J Cell Mol Res 7:59~67 google schola Yoo SD / 2007 / Arabidopsis mesophyll protoplasts : a versatile cell system for transient gene expression analysis / Nat Protoc 2:1565~1572 google schola Habibi-Pirkoohi M / 2016 / Transient expression of coat protein of foot and mouth disease virus(FMDV)in alfalfa(Medicago sativa)by agroinfiltration / J Cell Mol Res 8:83~89 google schola

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