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Amir Ghasemi (Kashan University of Medical Sciences) Sobhan Ghafourian (Ilam University of Medical Sciences) Sedighe Vafaei (Avicenna Research Institute) Reza Mohebi (Ilam University of Medical Sciences) Maryam Farzi (Avicenna Research Institute) Morovat Taherikalani (Lorestan University of Medical Sciences) Nourkhoda Sadeghifard (Ilam University of Medical Sciences)
저널정보
질병관리본부 Osong Public Health and Research Persptectives Osong Public Health and Research Persptectives Vol.6 No.6
발행연도
2015.1
수록면
336 - 340 (5page)

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Objectives: In an attempt α-amylase gene from Pyrococcus woesei was amplified and cloned into a pTYB2 vector to generate the recombinant plasmid pTY-α- amylase. Methods: Escherichia coli BL21 used as a host and protein expression was applied using IPTG. SDS-PAGE assay demonstrated the 100 kDa protein. Amylolytic activity of proteins produced by transformed E. coli cells was detected by zymography, and the rate of active α-amylase with and without the intein tag in both soluble conditions and as inclusion bodies solubilized by 4M urea were measured. Results: Amylolytic activity of ~185,000 U/L of bacterial culture was observed from the soluble form of the protein using this system. Conclusion: These results indicate that this expression system was appropriate for the production of thermostable α-amylase.

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