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효소는 세제, 식품, 사료, 의약품 및 의료용 분야 등 산업 전반적인 응용 분야에서 널리 사용되고 있으며, 산업제품 및 공정에서 주요 요인이다. 효소를 선별, 확인, 및 특성 분석을 위해 zymography 기술이 일상적으로 사용됩니다. Zymography 기술은 SDS-전기영동을 통해 단백질을 분리한 후 포함된 기질을 겔 상에서 분해하는 기능성 효소를 검출하는 데 널리 사용되는 단순하고 민감하며 정량화가 가능한 기술이다. 이 방법은 비 환원 조건하에서 SDS-전기영동 겔에서 전기영동에 의한 단백질의 분리와 겔 상에서 효소 활성을 검출하는 다목적 2 단계의 기술이다. 이는 SDS-전기영동 겔에 기질을 중합시키고 전기영동 분리 후 효소 반응 완충용액에서 복원된 가수분해 효소에 의해 분해되는 것을 기반으로 하는 기술이다. 미생물 배양액, 식물 추출물, 혈액, 조직 배양액, 식품 속 효소 및 메타 프로테옴을 포함한 어떤 종류의 생물학적 시료들을 zymography에 적용하고 분석이 가능하다. Zymography의 장점은 전처리 없이 혼합된 시료를 적용하여 SDS-전기영동 겔 상에서 활성을 지닌 단백질을 직접육안으로 검출이 가능할 뿐만 아니라 나노그람(nanogram) 수준에서 활성을 확인이 가능하다. 그래서 이 zymography 기술은 다양한 분야에 응용이 가능하다. 하지만, 이러한 장점이 오히려 단점으로 작용하여 실험적 오류를 범할 수 있는 경우가 많다. 본 총설에서 zymography 기술의 장점, 단점, 및 문제점 해결에 관해서 서술하였다.
목차
서론
본론
결론
References
초록
참고문헌 (41)
참고문헌 신청
Brown, T. L., Yet, M. G. and Wold, F. 1982. Substrate-containing gel electrophoresis: sensitive detection of amylolytic, nucleolytic, and proteolytic enzymes. Anal. Biochem. 122, 164-172
Choi, N. S., Choi, J. H., Kim, B. H., Han, Y. J., Kim, J. S., Lee, S. G. and Song, J. J. 2009. Mixed-substrate (glycerol tributyrate and fibrin) zymography for simultaneous detection of lipolytic and proteolytic enzymes on a single gel. Electrophoresis 30, 2232-2237.
Choi, N. S., Choi, J. H., Yoon, J. H., Lee, S. G. and Song, J. J. 2009. Identification of a serine protease from a Bacillus sp. using multiple loading of O’Farrell-type isoelectric fo cusing slab two-dimensional gel. Biotechnol. Lett. 31, 975-978.
Choi, N. S., Kim, B. H., Park, C. S., Han, Y. J., Lee, H. W., Choi, J. H., Lee, S. G. and Song, J. J. 2009. Multiple-layer substrate zymography for detection of several enzymes in a single sodium dodecyl sulfate gel. Anal. Biochem. 386, 121- 122.
Choi, N. S. and Kim, S. H. 1999. Application of fibrin zymography for determining the optimum culture time for protease activity. Biotechnol. Techniq. 13, 899-901.
Choi, N. S., Choi, J. H., Kim, B. H., Han, Y. J., Kim, J. S., Lee, S. G. and Song, J. J. 2009. Mixed-substrate (glycerol tributyrate and fibrin) zymography for simultaneous detection of lipolytic and proteolytic enzymes on a single gel. Electrophoresis 30, 2232-2237.
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Choi, N. S. and Kim, S. H. 1999. Application of fibrin zymography for determining the optimum culture time for protease activity. Biotechnol. Techniq. 13, 899-901.
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