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저자정보
저널정보
한국미생물생명공학회 Journal of Microbiology and Biotechnology Journal of Microbiology and Biotechnology 제16권 제2호
발행연도
2006.1
수록면
286 - 290 (5page)

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A genomic library of Streptococus vestibularisATC49124 was constructed in an E. coli plasmid vector, andthe urease-positive transformants harboring the urease genecluster were isolated on Christensen-urea agar plates. Theminimal DNA region required for urease activity was locatedin a 5.6 kb DNA fragment, and a DNA sequence analysisrevealed the presence of a partial ureI gene and seven completeopen reading frames, corresponding to ureA, B, C, E, F, G,and Dure gene cluster and 3'-end flanking region of S. vestibulariswas up to 95% identical to that of S. salivarius, anotherclosely related oral bacterium, and S. thermophilus, isolatedfrom dairy products. The predicted amino acid sequencesfor the structural peptides were 98-100% identical to thecorresponding peptides in S. salivarius and S. thermophilus,respectively, whereas those for the accessory proteins were96-100% identical. The recombinant E. coli strain containingthe S. vestibularis ure gene cluster expresed a high level ofthe functional urease holoenzyme when grown in a mediumsupplemented with 1 mM nickel chloride. The enzyme waspurified over 49-fold by using DEAE-Sepharose FF, SuperdexHR 200, and Mono-Q HR 5/5 column chromatography. Thespecific activity of the purified enzyme was 2,019 U/mg, andthe Michaelis constant (Kmbe 1.4 mM urea. A Superose 6HR gel filtration chromatographystudy demonstrated that the native molecular weight wasabout 196 kDa.
#Streptoccus vestibularis #urease #nickelStreptococcus vestibularis #a Gram-positive #catalase-negativefacultative anaerobic bacterium that is a member of theviridans group streptococci #was first isolated from thevestibular mucosa of human oral cavi

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