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저자정보
저널정보
한국미생물생명공학회 Journal of Microbiology and Biotechnology Journal of Microbiology and Biotechnology 제18권 제7호
발행연도
2008.1
수록면
1,221 - 1,226 (6page)

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The soft rot bacterium Pectobacterium wasabiae is an economically important pathogen of many crops. A new phytase gene, appA, was cloned from P. wasabiae by degenerate PCR and TAIL-PCR. The open reading frame of appA consisted of 1,302 bp encoding 433 amino acid residues, including 27 residues of a putative signal peptide. The mature protein had a molecular mass of 45 kDa and a theoretical pI of 5.5. The amino acid sequence contained the conserved active site residues RHGXRXP and HDTN of typical histidine acid phosphatases, and showed the highest identity of 48.5% to PhyM from Pseudomonas syringae. The gene fragment encoding the mature phytase was expressed in Escherichia coli BL21 (DE3), and the purified recombinant phytase had a specific activity of 1,072±47 U/mg for phytate substrate. The optimum pH and temperature for the purified phytase were pH 5.0 and 50oC, respectively. The Km value was 0.17 mM, with a Vmax of 1,714 μmol/min/mg. This is the first report of the identification and isolation of phytase from Pectobacterium.
#Histidine acid phosphatase #Pectobacterium wasabiae #phytase #phytopathogenic bacteria

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Bradford, M. M. / 1976 / A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal / Biochem 7 google schola Chatterjee, S. / 2003 / PhyA, a secreted protein of Xanthomonas oryzae pv. oryzae, is required for optimum virulence and growth on phytic acid as a sole phosphate source. Mol google schola Cho, J. S. / 2003 / Purification and characterization of a phytase from Pseudomonas syringae MOK1. Curr / Microbiol 47 : 290 ~ 294 google schola Cho, J. S. / 2005 / Molecular cloning of a phytase gene (phyM) from Pseudomonas syringae MOK1. Curr / Microbiol 51 : 11 ~ 15 google schola Choi, W. C. / 2002 / Medium optimization for phytase production by recombinant Escherichia coli using statistical experimental design. J. Microbiol / Biotechnol 12 : 490 ~ 49 google schola

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