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논문 기본 정보

자료유형
학술저널
저자정보
저널정보
대한진단검사의학회 Annals of Laboratory Medicine Annals of Laboratory Medicine 제26권 제2호
발행연도
2006.1
수록면
98 - 102 (5page)

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배경 : H. pylori의 감염진단을 위한 널리 이용되는 대변항원검사는 간편하여 널리 사용되고 있으나 대부분 수입에 의존하고 있다. H. pylori는 균주 마다 다양한 유전형질을 가지기 때문에 대변항원검사키트를 개발하기 위해서는 공통항원이면서 동시에 강한면역력을 갖는 단백질을 찾는 것이 중요하다. HP0231 단백질은여러 만성위염이나 궤양 환자의 혈청과 강한 반응을 보였다. 그러므로 본 연구에서는 HP0231 유전자를 목표유전자로 하여 고역가의 항체를 생산하고자 하였다.방법 :H. pylori의 염색체 DNA를 분리하고 PCR방법으로 증폭된 HP0231 유전자를 pET28a(+) 벡터에 클로닝하고 대장균에서 유도발현하였다. 발현된 HP0231 단백질을 Ni-NTA 친화크로마토그라피법과 전기영동법으로 분리하였다. 분리된 HP0231단백질을 토끼에 면역화시켜 항체를 획득하였다. 획득한 항체를부분적으로 분리하고 분리된 항체의 민감도와 특이성을 ELISA와 Western Blot 분석을 통해 확인하였다.결과 : HP0231 유전자를 클로닝한 후 염기서열을 확인한 결과Genbank (AA216016)의 염기서열과 동일하였다. HP0231 유전자를 과발현하고 HP0231 단백질을 분리하였다. 분리된 HP0231단백질의 면역화로부터 얻어진 항체는 위염 환자의 조직 세포 추출물과 H. pylori 배양세포 추출물과 분리된 HP0231 단백질에 대해 특이적으로 반응했다. 음성대조군인 대장균 배양세포 추출물과는 반응하지 않았다. 백만 배 희석한 항체에서도 1 g의 HP0231단백질과 반응하였다.
#Sensitivity접 수 : 2005년112월14일 접수번호 :KJLM1911수정본접수 : 2006년 43월 13일 #Helicobacter pylori HP0231 #Stool Antigen Detection #Antibody #Specificity

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