Identification of the protease inhibitory domain of Trichinella spiralis novel cystatin (TsCstN)

Thassanee Yuthithum; Orawan Phuphisut; Onrapak Reamtong; Nathamon Kosoltanapiwat; Salisa Chaimon; Porntida Kobpornchai; Charin Thawornkuno; Preeyarat Malaithong; Orathai Sawatdichaikul; Poom Adisakwattana

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자료유형: 학술저널

저자정보: Thassanee Yuthithum (Mahidol University) Orawan Phuphisut (Mahidol University) Onrapak Reamtong (Mahidol University) Nathamon Kosoltanapiwat (Mahidol University) Salisa Chaimon (Thammasat University) Porntida Kobpornchai (Mahidol University) Charin Thawornkuno (Mahidol University) Preeyarat Malaithong (Mahidol University) Orathai Sawatdichaikul (Kasetsart University) Poom Adisakwattana (Mahidol University)

저널정보: 대한기생충학열대의학회 Parasites, Hosts and Diseases Parasites, Hosts and Diseases Vol.62 No.3

발행연도: 2024.8

수록면: 330 - 341 (12page)

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The Trichinella spiralis novel cystatin (TsCstN) inhibits cathepsin L (CatL) activity and inflammation of macrophages during lipopolysaccharide (LPS) induction. To identify the protease inhibitory region, this study applied an in silico modeling approach to simulate truncation sites of TsCstN (Ts01), which created four truncated forms, including TsCstNΔ1-39 (Ts02), TsCstNΔ1-71 (Ts03), TsCstNΔ1-20, Δ73-117 (Ts04), and TsCstNΔ1-20, Δ42-117 (Ts05). The superimposition of these truncates modeled with AlphaFold Colab indicated that their structures were more akin to Ts01 than those modeled with I-TASSER. Moreover, Ts04 exhibited the closest resemblance to the structure of Ts01. The recombinant Ts01 (rTs01) and truncated proteins (rTs02, rTs03, and rTs04) were successfully expressed in a prokaryotic expression system while Ts05 was synthesized, with sizes of approximately 14, 12, 8, 10, and 2.5 kDa, respectively. When determining the inhibition of CatL activity, both rTs01 and rTs04 effectively reduced CatL activity in vitro. Thus, the combination of the α1 and L1 regions may be sufficient to inhibit CatL. This study provides comprehensive insights into TsCstN, particularly regarding its protein function and inhibitory domains against CatL.

#Trichinella spiralis #novel cystatin #in silico analysis #protein truncation #protease inhibitor #cathepsin L

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