현재 항염증 활성에 대한 효능이 검증된 acemannan과 aloesin을 다양한 비율로 혼합하여 비율에 따른 항염증 효능을 확인하고자 본 연구를 진행하였다. 항염증 활성은 NO, PGE2, TNF-α 및 IL-6 생성량 및 염증 관련 단백질인 iNOS, COX-2의 발현량에 대한 효능을 검증하였다. Acemannan과 aloesin 각각의 NO 생성 저해 활성 결과와 혼합 시료인 AA-1, AA-2, AA-3, AA-4, AA-5의 NO 생성 저해 활성 결과를 비교하였을 때, 혼합 시료가 더 우수한 NO 생성 저해 활성을 나타내는 것을 확인하였다. 이후 최적의 배합 비율을 찾기 위해 PGE2, TNF-α 및 IL-6 생성량에 대해 측정하였다. 그 결과, 시료 5종 모두 최종 농도인 100 μg/mL 농도에서 LPS 단독 처리군 대비 저해 효과가 나타났으며, 이 중 AA-2의 저해 효과가 가장 높은 것을 확인하여 western blot을 통한 염증 관련 단백질 발현량은 AA-2를 이용하여 실험을 진행하였다. 염증 관련 단백질인 iNOS 및 COX-2의 발현량을 측정 결과, AA-2는 농도 의존적으로 감소하였으며, 최종 농도인 100 μg/mL 농도에서 LPS 단독 처리군 대비 각각 25% 이상의 억제 효과가 나타나는 것을 확인하였다. 이러한 결과들을 토대로 acemannan과 aloesin을 다양한 비율로 배합하였을 때, 항염증 활성을 가진 것을 확인하였으며, 이 중 acemannan과 aloesin이 1:2의 비율로 혼합되었을 때 가장 높은 항염증 활성을 나타내었다. 결론적으로 acemannan과 aloesin을 혼합한 시료는 다양한 기능성 소재로써 활용이 가능하며, 이후 항염증 활성 실험들의 기초자료로도 활용이 가능한 것을 확인하였다.
This study aims to confirm the anti-inflammatory activities of acemannan and aloesin, which have been studied for various efficacies at various mixed sample ratios. The mixed samples were mixed at a ratio of 1:1 (AA-1), 1:2 (AA-2), 1:3 (AA-3), 2:1 (AA-4), and 3:1 (AA-5). Seven samples were evaluated for their cytotoxic ability on macrophages, and the results showed that all cell viability was over 90% at a concentration of 100 μg/mL. First, due to the NO production inhibitory activity, a better inhibitory effect was achieved when using a mixed sample rather than a single material. Afterward, the activity of inhibiting the production of PGE2, TNF-α, and IL-6 was confirmed using a mixed sample. It was confirmed that AA-2 had the best inhibitory activity on producing PGE2, TNF-α, and IL-6 rather than AA-1, AA-3, AA-4, and AA-5. For this reason, experiments were conducted using AA-2 to determine the protein expression levels of iNOS and COX-2, which are inflammation-related proteins. It was confirmed that AA-2 inhibited iNOS and COX-2 protein expression by 25.01% and 27.27%, respectively, compared to the LPS-alone treatment group. In conclusion, the mixed sample of acemannan and aloesin is judged to have anti-inflammatory activity and can potentially to be used as a functional material.