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학술저널
저자정보
Seo, Hea-Kyung (Graduate School of Biotechnology, Kyung Hee University) Yoo, Ki-Hyun (Graduate School of Biotechnology, Kyung Hee University) Jeon, Hwang-Bo (Graduate School of Biotechnology, Kyung Hee University) Seok, Yeon-Ju (Graduate School of Biotechnology, Kyung Hee University) Kim, Kyung-Il (Graduate School of Biotechnology, Kyung Hee University) Baek, Nam-In (Graduate School of Biotechnology, Kyung Hee University) Lee, Youn-Hyung (College of Life Sciences, Kyung Hee University) Yang, Jai-Myung (Department of Life Science, Sogang University) Chung, In-Sik (Graduate School of Biotechnology, Kyung Hee University)
저널정보
한국응용생명화학회 Applied Biological Chemistry Applied Biological Chemistry 제52권 제2호
발행연도
2009.1
수록면
109 - 113 (5page)

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${\beta}$-Secretase (${\beta}$-SEC) is one of the prime targets for therapeutic intervention of Alzheimer's disease. We previously described the expression of human ${\beta}$-SEC in Trichoplusia ni BTl Tn5B1-4 cells transformed with cDNAs encoding ${\beta}$1,4-galactosyltransferase (GalT) and Gal${\beta}$1,4-GlcNAc ${\alpha}$2,6sialyltransferase (ST). To extend this work we investigated the kinetics of recombinant ${\beta}$-secretase and the feasibility of recombinant ${\beta}$-secretase for its inhibitor screening application. Recombinant ${\beta}$-SECs were purified from cultures of Tn5B1-4${\beta}$SEC and Tn5B1-4${\beta}$SEC/GaIT-ST cells. Recombinant ${\beta}$-SEC from Tn5B1-4${\beta}$SEC/GaIT-ST cells exhibited a higher $K_{cat}/K_M$ value compared to the control Tn5B1-4${\beta}$SEC cells. We also attempted to screen the compounds inhibiting the activity of recombinant ${\beta}$-secretase among the metabolites isolated from Chrysanthemum coronarium L. Based on the inhibition analysis using purified ${\beta}$-SEC from Tn5B1-4${\beta}$SEC/GaIT-ST cells, 3-0-[${\beta}$-D-galactopyranosyl (1${\longrightarrow}$6)-${\alpha}$-D-galactopyranosyl]-glyceride was the best inhibitor among the compounds tested. The concentration at half-maximum inhibition values ($IC_{50}$) of this compound was estimated to be 2.8 ${\mu}M$.
#enzymatic activity #recombinant ${beta}$-secretase #Trichoplusia ni Tn5B1-4 cells #3-0-[ ${beta}$-D-galactopyranosyl #1 ${longrightarrow}$6)- ${alpha}$-D-galactopyranosyl]-glyceride

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