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소나무재선충(pine wood nematode, PWN) 감염 소나무를 현장에서 신속하게 진단을 할 수 있는 방법은 현재 없다. 본 연구에서는 PWN특이적인 항원으로 알려진 PWN-GaLectin을 baculovirus발현체계로 발현시켜서 총 1,464개의 fusion hybridoma 세포 주 라이브러리를 제작 하는 항원으로 이용하였다. 총 1,464개의 fusion hybridoma 세포 주 중, PWN-GaLectin에 대한 높은 반응을 보이는 62개의 fusion hybridoma 세포 주를 선별했다. 이들 중, 표준 PWN 감염소나무 PBS추출물과 PWN 단백질 추출물에 강한 반응을 보이는 세포 주 12개를 선별하여 단클론 항체(monoclonal antibody, Mab) 분비세포 주 확립을 위한 limited dilution을 실시하였다. Mab분비세포 주 확립을 위해서 표준 PWN 감염소나무 추출물에 대한 반응이 표준 정상 소나무 추출물 보다 높은 세포 주들을 선별했다. 그리고 추가로 PWN 단백질 추출물에 대해서 3종의 비 병원성 선충 단백질 추출물 보다 높은 반응을 보이는 세포 주들도 선별, 확립했다. 본 연구에서 확립된 Mab들을 우리는 현장과 실험실에서 사용할 수 있는 신속진단키트의 개발에 이용할 수 있을 것이다.
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Barondes, S.H. / 1994 / Galectins: Structure and function of a large family of animal lectins / J. Biol. Chem. 269:20807~20810
Cao, A.X. / 2005 / Detection of the pinewood nematode, Bursaphelenchus xylophilus, using a real-time polymerase chain reaction assay / Phytophathology 95:566~571
Futai, K. / 2013 / Pine wood nematode, Bursaphelenchus xylophilus / Annu. Rev. Phytopathol. 51:61~83
Kang, J.S. / 2004 / Development of an efficient PCR-based diagnosis protocol for the identification of the pinewood nematode, Bursaphelenchus xylophilus (Nematoda: Aphelenchoididae) / Nematology 6:279~285
Kang, J.S. / 2015 / Development of two alternative loop-mediated isothermal amplification tools for detecting pathogenic pine wood nematodes / For. Pathol. 45:127~133
Cao, A.X. / 2005 / Detection of the pinewood nematode, Bursaphelenchus xylophilus, using a real-time polymerase chain reaction assay / Phytophathology 95:566~571
Futai, K. / 2013 / Pine wood nematode, Bursaphelenchus xylophilus / Annu. Rev. Phytopathol. 51:61~83
Kang, J.S. / 2004 / Development of an efficient PCR-based diagnosis protocol for the identification of the pinewood nematode, Bursaphelenchus xylophilus (Nematoda: Aphelenchoididae) / Nematology 6:279~285
Kang, J.S. / 2015 / Development of two alternative loop-mediated isothermal amplification tools for detecting pathogenic pine wood nematodes / For. Pathol. 45:127~133
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