Improved Transformation of the Filamentous Fungus Aspergillus niger Using Agrobacterium tumefaciens

Park, Seung-Moon

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자료유형: 학술저널

저자정보: Park, Seung-Moon (Basic Science Research Institute, Chonbuk National University)

저널정보: 한국균학회 Mycobiology Mycobiology 제29권 제3호

발행연도: 2001.1

수록면: 132 - 134 (3page)

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Since it is known that Agrobacterium tumefaciens, which has long been used to transform plants, can transfer the T-DNA to yeast Saccharomyces cerevisiae during tumourigenesis, a variety of fungi were subjected to transformation to improve their transformation frequency. In this study, I report the A. tumefaciens-mediated transformation of filamentous fungus Aspergillus niger. Transfer of the binary vector pBIN9-Hg, containing the bacterial hygromycin B phosphotransferase gene under the control of the Aspergillus nidulans trpC promoter and terminator as a selectable marker, led to the selection of $50{\sim}100$ hygromycin B-resistant transformants per $1{\times}10^7$ conidia of A. niger. This efficiency is improved $10{\sim}20$ fold more than reported elsewhere. In order to avoid the difficulties in selection transformant from the over-growing non-transformant, I used top agar containing 900 ${\mu}g/ml$ of hygromycin. Genomic PCR and Southern analysis showed that all transformants contained single T-DNA insert per fungal genome. This technique offers an easier and more efficient method than that of using protoplast.

#Aspergillus niger #Fungal transformation

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주요연구분야 자연과학 > 생물학

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