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학술저널
저자정보
Yoon, Hong-Tak (College of Pharmacy, Chungbuk National University) Yoo, Hwan-Soo (College of Pharmacy, Chungbuk National University) Shin, Bum-Kyu (College of Pharmacy, Chungbuk National University) Lee, Woo-Jin (College of Pharmacy, Chungbuk National University) Kim, Hwan-Mook (Genetic Resources Center, Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology, KIST) Hong, Seon-Pyo (College of Pharmacy, Kyung Hee University) Moon, Dong-Cheul (College of Pharmacy, Chungbuk National University) Lee, Yong-Moon (College of Pharmacy, Chungbuk National University)
저널정보
대한약학회 Archives of pharmacal research : a publication of the Pharmaceutical Society of Korea Archives of pharmacal research : a publication of the Pharmaceutical Society of Korea 제22권 제3호
발행연도
1999.1
수록면
294 - 299 (6page)

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Precolumn orthophthaldehyde (OPA) labeling method of sphingoid bases, sphingosine and sphinganine, was investigated to obtain high fluorescent detectability. In order to improve the fluorescent yield, we investigated the optimal solubility of sphingoid bases for five pre-incubation solvents by incorporating the heating procedure before OPA derivatization. The pre-incubation in ethanol prominently increased the fluorescent peak height of OPA derivative for each sphingoid bases in high performance liquid chromatography. About tenfold increase of detectability was archived by pre-incubating lipid extracts pellets in ethanol at $60^{\circ}C$ for 30 min. Optimal derivatization was performed in 30 min at ambient temperature and the fluorescent intensity of OPA derivative was stable for two weeks at $4^{\circ}C$. The detection limit of sphingosine was 0.1 pmol as injected amount. This method was applied to the determination of cellular sphingosine and sphinganine in various human lung cancer cells. This OPA procedure was prospective to be useful for quantitating the amount of sphingoid bases in other cancer cells.
#Sphingosine #Sphinganine #Pe-incubation #OPA #Fluorescent derivatization #HPLC #Lung cancer cells

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