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논문 기본 정보

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학술저널
저자정보
이정렬 (건국대학교 동물자원연구센터) 김창규 (건국대학교 동물자원연구센터) 김종배 (건국대학교 동물자원연구센터)
저널정보
한국동물번식학회 한국동물번식학회지 한국동물번식학회지 제17권 제1호
발행연도
1993.1
수록면
43 - 48 (6page)

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These experiments were carried out to construct mouse testis cDNA library and to to seen H-Y Ag gene. Mouse testis was obtained from BALB/c inbreed mouse that was after-born 1 week. Isolation of mouse testis total RNA was carried out by guanidum/cesium choloride, poly(A+) mRNAs were purified by oligo d(T)-cellulose chromatography method. To investigate protein synthesis activity, in-vitro translation carried out by total RNA and poly(A+) mRNA. The products of in-vitro translation were identified in 12.5% PAGE. Single strand DNA and double strand DNA were synthesized from poly(A+) mRNA and purified using phenol/chloroform/isoamylalcohol. Synthesized cDNA was combined with cohesive Eco RI polylinker, its recombination efficiencies were identified by X-gal and IPTG. In the cDNA library, 1$\times$107 phagemids were screened with 32P labelled probe. Hybridization were carried on $65^{\circ}C$ for 16~20hours. And 1$\times$106 phagemids were screened with rabbit-anti-H-Y. In former, select 5 positive clones, and later, 1 positive clone. Its southern blot analysis showed various size of insert cDNA from 0.7kb to 3kb.

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