자성 미세입자에의 항체 고정화 방법이 면역결합반응에 미치는 영향

최효진; 황상연; 장대호; 조형민; 강정혜; 성기훈; 주재범; 이은규

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자료유형: 학술저널

저자정보: 최효진 (한양대학교 화학공학과 생물공정연구실) 황상연 (한양대학교 화학공학과 생물공정연구실) 장대호 (한양대학교 화학공학과 생물공정연구실) 조형민 (한양대학교 화학공학과 생물공정연구실) 강정혜 (한양대학교 응용화학과) 성기훈 (한양대학교 응용화학과) 주재범 (한양대학교 화학공학과 생물공정연구실) 이은규 (Celltrion Quality Control Group)

저널정보: 한국화학공학회 화학공학 화학공학 제44권 제1호

발행연도: 2006.1

수록면: 65 - 72 (8page)

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자력을 이용한 분리기술의 장점을 이용하여 여러 가지 불순물들이 섞여 있는 현탁 용액으로부터 자성입자를 이용하여 목적 단백질만을 얻어낼 수 있는 기술의 가능성에 대하여 알아보고자 하였다. 자성입자를 이용하는 경우에는 (1) 자성입자 표면에 리간드 고정화, (2) ligand(리간드)와 목적 물질과의 특이적 결합, (3) 자력을 이용한 자성입자의 분리, (4) 목적 물질의 탈착 그리고 (5) 자성입자의 재사용 순서로 진행되어 여러 단계의 공정을 단순화시킬 수 있다. 이러한 자성입자를 이용한 방법은 효율성, 단순성, 까다롭지 않은 조건, 자동화의 용이성, 비용의 저렴함으로 인해 관심이 증대되고 있다. 본 연구에서는 표면이 카르복실기로 처리된 자성입자에 IgG 항체를 고정화시킨 후 IgG를 목적 단백질로 하여 이를 분리해내고자 하였다. 이를 위하여 자성입자 표면에 다른 물질과의 비특이적 결합이 일어나지 않을 조건에 대하여 확인해 보았으며, IgG 항체를 배향성 고정화시켜 자성입자가 목적 단백질과 보다 효과적으로 결합하여 목적 단백질인 IgG만을 선택적으로 분리해 낼 수 있는지에 대하여 알아보았다. 높은 pH를 사용할 경우 비특이적 흡착을 줄일 수 있었으며, IgG 항체 고정화된 자성입자를 사용할 경우 목적 단백질인 IgG와 선택적으로 반응함을 알 수 있었다. IgG 항체의 고정화에서 Fc지역 C-terminus에 인접해 있는 탄수화물 부분을 이용하여 배향성을 준 경우, IgG 항체 내의 아민기와 고정화시키는 비배향성 고정화 방법보다 항원과의 결합능력이 약 2배 높았다.

#Magnetic Particles #Biorecognition of IgG #Oriented Immobilization #Surface Modification

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