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논문 기본 정보
- 자료유형
- 학술저널
- 저자정보
- 발행연도
- 2006.1
- 수록면
- 1,043 - 1,050 (8page)
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=목적: 제대정맥내피세포 (human umbilical vein endothelial cell; 이하 HUVEC)에 heat shock 및 H2O2 이용하여 스트레스를 가한 뒤 heat shock protein (hsp) 90 및 hsp27의 발현여부를 확인하고 HUVEC에서 나타나는 세포보호작용을 확인하고자 하였다.연구 방법: 0.25% trypsin을 제대정맥 내로 주입 후 HUVEC를 분리하였고 EBM2 (Gibco, USA) 배양액을 사용하여 5 mL의 세포배양용 plastic flasks에 넣고 37℃ 5% CO2 배양기에서 증식배양 하였다. 배양액은 일주일에 2회 교환하여 주었다. 70%의 융합상태에 도달할 때까지 배양한 후 세포로부터 단백질을 추출하여 CD34와 von Willebrand factor (vWF)항체들을 이용하여 순수 HUVEC을 확인하였다. HUVEC을 각각 37℃ 상태의 대조군, 43℃에서 30분 heat stress가한 열충격군, 100 M의 H2O2에 60분간 노출시킨 H2O2 처치군 및 같은 조건의 heat stress 후에서 H2O2에 60분간 노출시킨 열충격+ H2O2 처치군으로 나누어 처리한 후 단백질을 추출하여 hsp90 및 hsp27의 발현의 차이를 western blot을 이용하여 살펴보았다.결과: HUVEC은 7일째 완전융합상태에 도달하였다. CD34 및 vWF를 western blot assay로 관찰한 결과, 양성대조로 사용된 정맥조직과 배양한 세포 모두에서 CD34 및 vWF의 일정한 발현 양상을 관찰하였다. 모든 실험 조건하에서 HUVEC에서 hsp90 및 hsp27의 발현을 관찰할 수 있었다. hsp27은 열충격+ H2O2 처치군과 열충격군에서 대조군 및 H2O2 처치군보다 더 강하게 나타나는 것을 관찰하였다.
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/ / The biology of heat shock proteins and molecular chaperons
/ / structure/ function of stress protein and implications for medicine and disease : 1063 ~ 80
/ 1922 / Endothelium in tissue cultures 30 : 39 ~ 60
/ 1959 / The histological localization of fibrinolysin activator 78 : 281 ~
/ 1963 / The human endothelial cell tissue culture 60 : 69 ~
/ / structure/ function of stress protein and implications for medicine and disease : 1063 ~ 80
/ 1922 / Endothelium in tissue cultures 30 : 39 ~ 60
/ 1959 / The histological localization of fibrinolysin activator 78 : 281 ~
/ 1963 / The human endothelial cell tissue culture 60 : 69 ~
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