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논문 기본 정보
- 자료유형
- 학술저널
- 저자정보
- 발행연도
- 2006.1
- 수록면
- 2,297 - 2,309 (13page)
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=목적: 임신 7주경 태아 고환의 미숙 Sertoli 세포에서 생산되어 Muller관을 퇴행시키는 Mullerian inhibiting substance (MIS)는 성 발달과 가임기 여성의 생식생리 기전을 조절하는 이외에 Muller관으로부터 발생하는 일부 종양과 세포주의 성장을 in vivo와 in vitro에서 억제한다는 사실이 밝혀졌다. 이에 본 연구자들은 난소상피암 세포주들에서 MIS type II 수용체 (MISR II)의 발현을 확인하고, MIS를 투여하여 MIS의 세포 증식 억제효과와 그 기전을 밝힘으로서 종양치료제로서 MIS의 임상적 사용에 대한 가능성을 알아보고자 하였다.연구 방법: 난소암 세포주인 SKOV-3, OVCAR-3 및 OVCAR-8에서 면역조직화학염색법으로 MISR II의 발현여부를 확인하였다. 난소암 세포주의 생존도는 고순도 MIS를 투여하여 24시간과 48시간동안 배양한 후 MTT assay로 측정하였다. MIS에 의한 세포주기 변화는 DNA 염색 후 flow cytometer로 분석하였으며 세포자멸사는 annexin-V-FITC 염색방법을 이용하여 flow cytometer로 평가하였다. MIS에 의한 난소암 세포주의 성장억제 감수성 차이와 세포자멸사 기전을 알아보기 위해 western blot 분석법을 이용하였다.결과: 모든 난소암 세포주에서 MISR II 발현이 관찰되었지만, 발현정도는 OVCAR-8에서 제일 강했다. 세포 생존도는 OVCAR-8만이 MIS의 처치 용량과 시간에 따라 감소하였고, OVCAR-3은 고농도 MIS로 48시간 투여한 경우에만 의의 있게 감소하였으나, SKOV-3은 반응하지 않았다. Flow cytometer로 조사한 세포주기 변화는 OVCAR-8에서 10 g/mL MIS로 24시간 처치한 경우에 G1세포주기 정지 소견을 보였으며, 48시간 후에는 세포자멸사를 의미하는 sub G0G1분기 분획이 7.02%로 나타나, MIS는 세포주기의 변화를 먼저 일으킨 후 세포자멸사를 유발하였다. OVCAR-3에서는 48시간 후 sub G0G1분기가 3.32%였으나 SKOV-3에서는 변화가 없었다. Annexin-V-FITC 염색방법으로, OVCAR-8과 OVCAR-3에서 48시간 MIS 처치 후에 각각 8.05%와 3.67%의 세포자멸사가 관찰되었다. Western blot 분석으로, OVCAR-8에서 MIS에 의한 세포 증식 억제에 이은 세포자멸사는 p16단백 증가와 연관이 있다고 판단된다. 또한 MIS는 OVCAR-8에서 MISR II와 결합한 후 pRb 비의존적인 세포내 경로를 통해 간접적으로 E2F1 활성 증가로 세포자멸사를 유도할 가능성이 있다.
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