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The functional stability of mRNA is one of thecrucial factors affecting the eficiency of in vitro translation.extract) causes early termination of the translational reactions,extending the mRNA half-life wil improve the productivityof the in vitro protein synthesis. Thus, a simple PCR-basedmethod is introduced to increase the stability of mRNA in anS30 extract. The target genes are PCR-amplified with primersdesigned to make the ends of the transcribed mRNA moleculeanneal to each other. When compared with normal mRNA,aproximately 2-fold increase of protein synthesis in an invitro translation reaction. In addition, sequential transcriptionand translation reactions in a single tube enabled directprotein expresion from the PCR-amplified genes without anyseparate purification of the mRNA.

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