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Sexual reproduction plays an important role in thebiology and epidemiology of oomycete plant pathogens suchas the heterothallic species Phytophthora infestans. Recentworldwide dispersal of A2 mating type strains of P. infestansresulted in increased virulence, gene transfer, and geneticvariation, creating new challenges for disease management.To develop a genetic assay for mating type identificationin P. infestans, we used the Amplified Fragment LengthPolymorphism (AFLP) technique. The primer combinationE+AT/M+CTA detected a fragment specific to A1 matingtype (Mat-A1) of P. infestans. This fragment was cloned andsequenced, and a pair of primers (INF-1, INF-2) weredesigned and used to differentiate P. infestans Mat-A1 fromMat-A2 strains. The Mat A1-specific fragment was detectedusing Southern blot analysis of PCR products amplified withprimers INF-1 and INF-2 from genomic DNA of 14 P.infestans Mat-A1 strains, but not 13 P. infestans Mat-A2strains or 8 other isolates representing several Phytophthoraspp. Southern blot analysis of genomic DNAs of P. infestansisolates revealed a 1.6 kb restriction enzyme (EcoRI, BamHI,AvaI)-fragment only in Mat-A1 strains. The A1 mating typespecificprimers amplified a unique band under stringentannealing temperatures of 63oC-64oC, suggesting that thisPCR assay could be developed into a useful method formating type determination of P. infestans in field material.

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