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논문 기본 정보

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학술저널
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저널정보
한국미생물생명공학회 Journal of Microbiology and Biotechnology Journal of Microbiology and Biotechnology 제15권 제3호
발행연도
2005.1
수록면
652 - 655 (4page)

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This paper describes the development of anenzymatic assay system for the identification of inhibitors ofisocitrate lyase (ICL), one of the key enzymes of the glyoxylatecycle that is considered as a new target for antifungal drugs. A1.6 kb DNA fragment encoding the isocitrate lyase fromCandida albicans ATCC10231 was amplified by PCR, clonedinto a vector providing His-Patch-thioredoxin-tag at the Nterminus,expressed in Escherichia coli, and purified by metalchelate affinity chromatography. The molecular mass of thepurified ICL was approximately 62 kDa, as determined bySDS-PAGE, and the enzyme activity was directly proportionalto incubation time and enzyme concentration. The effectsof itaconate-related compounds on ICL activity were alsoinvestigated. Among them, itaconic acid, 3-nitropropionate,and oxalate had strong inhibitory activities with IC50 values of5.8, 5.4 and 8.6 μg/ml, respectively. These inhibitors alsoexhibited antifungal activity on YPD agar media containingacetate as a sole carbon source, albeit at high concentration.The results indicate that the C. albicans ICL may be aregulatory enzyme playing a crucial role in fungal growth andis a prime target for antifungal agents.

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