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학술저널
저자정보
저널정보
한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 한국미생물·생명공학회지 제36권 제3호
발행연도
2008.1
수록면
173 - 181 (9page)

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Bovine blood, cell, tissue, and organ are used as raw materials for manufacturing biologics such as biopharmaceuticals, tissue-engineered products, and cell therapy. Manufacturing processes for the biologics have the risk of viral contamination. Therefore viral validation is essential in ensuring the safety of the products. Bovine parvovirus (BPV) is one of the common bovine pathogens and has widely been known as a possible contaminant of biologics. In order to establish the validation system for the BPV safety of biologics, a real-time PCR method was developed for quantitative detection of BPV contamination in raw materials, manufacturing processes, and final products. Specific primers for amplification of BPV DNA were selected, and BPV DNA was quantified by use of SYBR Green I. The sensitivity of the assay was calculated to be 1.3 × 10-1 TCID50/mL. The real-time PCR method was validated to be reproducible and very specific to BPV. The established real-time PCR assay was successfully applied to the validation of Chinese hamster ovary (CHO) cell artificially infected with BPV. BPV DNA could be quantified in CHO cell as well as culture supernatant. Also the real-time PCR assay could detect 1.3 × 100 TCID50/ mL of BPV artificially contaminated in bovine collagen. The overall results indicated that this rapid, specific, sensitive, and robust assay can be reliably used for quantitative detection of BPV contamination during manufacture of biologics.
#Bovine parvovirus #Chinese hamster ovary #CHO) cell #collagen #real-time PCR #virus validation

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참고문헌 (25)

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/ 1996 / Code of federal regulation 9 (9CFR), animal and animal products, 113.53. Requirement for ingredients of animal origin used for production of biologics google schola Adamson, S. R / 1999 / Experiences of virus, retrovirus and retrovirus-like particles in chinese hamster ovary (CHO) and hybridoma cells used for production of protein therap google schola Barnes, M. A. / 1982 / Frequency of bluetongue and bovine parvovirus infection in cattle in South Carolina dairy herds / Am. J. Vet. Res 43 : 1078 ~ 1080 google schola Belak, S / 2007 / Molecular diagnosis of viral diseases, present trends and future aspects: A view from the OIE collaborating centre for the application of polymerase chain r google schola Belak, S. / 2001 / Molecular diagnosis of animal diseases: some experiences over the past decade / Expert Rev. Mol. Diagn 1 : 434 ~ 443 google schola

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