생물의약품 제조공정에서 Bovine Viral Diarrhoea Virus 정량검출을 위한 Real-Time RT-PCR

조항미; 이동혁; 김현미; 김인섭

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자료유형: 학술저널

저자정보: 조항미 이동혁 김현미 김인섭

저널정보: 한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 한국미생물·생명공학회지 제36권 제1호

발행연도: 2008.1

수록면: 34 - 42 (9page)

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Bovine blood, cell, tissue, and organ are used as raw materials for manufacturing biologics such as biopharmaceuticals, tissue engineered products, and cell therapy. Manufacturing processes for the biologics using bovine materials have the risk of viral contamination. Therefore viral validation is essential in ensuring the safety of the products. Bovine viral diarrhoea virus(BVDV) is the most common bovine pathogen and has widely been known as a contaminant of biologics. In order to establish the validation system for the BVDV safety of biologics, a real-time RT-PCR method was developed for quantitative detection of BVDV contamination in raw materials, manufacturing processes, and final products. Specific primers for amplification of BVDV RNA was selected, and BVDV RNA was quantified by use of SYBR Green I. The sensitivity of the assay was calculated to be 1 TCID50/mL. The real-time RT-PCR method was validated to be reproducible and very specific to BVDV. The established real-time RTPCR assay was successfully applied to the validation of Chinese hamster ovary (CHO) cell artificially infected with BVDV. BVDV RNA could be quantified in CHO cell as well as culture supernatant. Also the real-time RT-PCR assay could detect 10 TCID50/mL of BVDV artificially contaminated in bovine collagen.

#Bovine viral diarrhoea virus #Chinese hamster ovary #CHO) cell #collagen #real-time RT-PCR #virus validation. .. .. ..

참고문헌 (25)

참고문헌 신청

/ 1996 / Code of federal regulation 9(9CFR),animal and animal products

Adamson, S. R / 1999 / Experiences of virus, retrovirus and retrovirus-like particles in chinese hamster ovary (CHO) and hybridoma cells used for production of protein therap

Bhudevi, B. / 2003 / Detection of bovine viral diarrhoea virus in formalin fixed paraffin embedded tissue sections by real time RT-PCR (Taqman) / J. Virol. Methods 109 : 25 ~

Bolin, S. R. / 1994 / Survery of cell lines in the American Type Culture Collection for bovine viral diarrhea virus / J. Virol. Methods 48 : 211 ~ 221

Bruhn, S. / 2005 / Application of RT-PCR for the detection of avian reovirus contamination in avian viral vaccines / J. Virol. Methods 123 : 179 ~ 186

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