Saccharomyces cerevisiae에서 Human Procarboxypeptidase B의과발현 분비생산과 그 특성

김미정; 김미진; 이재형; 김연희; 서진호; 남수완

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자료유형: 학술저널

저자정보: 김미정 김미진 이재형 김연희 서진호 남수완

저널정보: 한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 한국미생물·생명공학회지 제36권 제1호

발행연도: 2008.1

수록면: 49 - 54 (6page)

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The gene encoding human pancreatic pro-carboxypeptidase B (CPB) was cloned and fused to Saccharomyces cerevisiae mating factor alpha-1 secretion signal (MFα1), in which the transcription of MFα1-pro-CPB was under the control of GAL10 promoter. The constructed plasmid pYα-hproCPB (7.72 kb) was transformed into S. cerevisiae 2805. The recombinant human pro-CPB (hproCPB) was successfully expressed in S. cerevisiae after induction of galactose, and could be secreted into the culture medium. By analyses of SDS-PAGE and western blotting, the molecular weight of the purified hproCPB was estimated to be a 45.9 kDa. The activity of extracellular hCPB after removal of pro-region by trypsin treatment reached about 10.16 unit/ml at batch culture of S. cerevisiae 2805/pYα-hproCPB for 60 h. Also, the Km value of partially purified recombinant hCPB is about 0.43 mM.

#Carboxypeptidase B #GAL10 promoter #Saccharomyces cerevisiae #mating factor alpha-1 #MFα1) #secretion. .. .. ... .. .. 1. 1... ..

참고문헌 (21)

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Bradley, G. / 1996 / Ostrich (Struthio camelus) carboxypeptidase B: purification, kinetic properties and characterization of the pancreatic enzyme / Int. J. Biochem. Cell Bio

Burgous, F. J. / 1991 / Analysis of the activation process of porcine pro-carboxypeptidase B and determination of the sequence of its activation segment / Biochemistry 30 : 4

Datar, R / 1990 / Process economics downstream separation processes in biotechnology / Marcel Dekker Inc. : 741 ~ 793

Donald, F. S. / 1971 / Isolation and characterization of proinsulin C-peptide from bovine pancreas / J. Biol. Chem 246 : 1375 ~ 1382

Fayerman, J. T. / 1997 / DNA sequences encoding porcine pancreatic carboxypeptidase B. US Patent

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