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논문 기본 정보

자료유형
학술저널
저자정보
저널정보
대한치주과학회 Journal of Periodontal & Implant Science Journal of Periodontal & Implant Science 제39권 제2호
발행연도
2009.1
수록면
231 - 237 (7page)

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Purpose: Cytolethal distending toxin (CDT) is a family of heat-labile cytotoxins produced by several gram-negative mucosa-associated pathogens, including Aggregatibacter actinomycetemcomitans. CDT is well known to be capable of inducing growth arrest, morphological alterations, and eventually death in various cells. CDT belongs to a tripartite AB₂ toxin (CdtB: the enzymatic A subunit; CdtA and CdtC: the heterodimeric B subunit). Previous studies proposed that CdtA and CdtC together bind to a cell surface receptor and glycolipids act as a receptor for A. actinomycetemcomitans CDT (AaCDT). In this study, recombinant CdtA and CdtC proteins of AaCDT were co-expressed in a bacterial expression system and tested for their affinity for GM₁ ganglioside. Methods: The genes for CdtA and CdtC from A. actinomycetemcomitans Y4 were utilized to construct the expression vectors, pRSET-cdtA and pET28a-cdtC. Both CdtA and CdtC proteins were expressed in Escherichia coli BL21(DE3) and then purified using hexahistidine (His6) tag. The identity of purified protein was confirmed by anti-His6 antibody and monoclonal anti-CdtA antibody. Furthermore, the affinity of recombinant protein to GM₁ ganglioside was checked through ELISA. Results: Recombinant CdtA and CdtC proteins were expressed as soluble proteins and reacted to anti-His6 and monoclonal anti-CdtA antibodies. ELISA revealed that purified soluble CdtA-CdtC protein bound to GM₁ ganglioside, while CdtA alone did not. Conclusions: Co-expression of CdtA and CdtC proteins enhanced the solubility of the proteins in E. coli, leading to convenient preparation of active CdtA-CdtC, a critical material for the study of AaCDT pathogenesis. (J Korean Acad Periodontol 2009;39:231-237)
#Aggregatibacter actinomycetemcomitans #toxin

목차

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참고문헌 (21)

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Ahmed HJ / 2001 / Prevalence of cdtABC genes encoding cytolethal distending toxin among Haemophilus ducreyi and Actinobacillus actinomycetemcomitans strains / J Med Microbiol google schola Belibasakis G / 2002 / Inhibited proliferation of human periodontal ligament cells and gingival fibroblasts by Actinobacillus actinomycetemcomitans: involvement of the cytole google schola Belibasakis GN / 2005 / The cytolethal distending toxin induces receptor activator of NF-kappaB ligand expression in human gingival fibroblasts and periodontal ligament cells google schola Belibasakis GN / 2008 / Cytolethal distending toxin upregulates RANKL expression in Jurkat T-cells / APMIS 116 : 499 ~ 506 google schola Boesze-Battaglia K / 2006 / Cholesterolrich membrane microdomains mediate cell cycle arrest induced by Actinobacillus actinomycetemcomitans cytolethal- distending toxin / Ce google schola

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